细胞培养的操作步骤
一、原代培养及其操作步骤 原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后,经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群,使之在体外模拟人体生理环境,在无菌、适当温度和一定的营养条件下,生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分,生长缓慢,但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞培养做各种实验,如药物测试、细胞分化及病毒学方面的试验效果很好。其操作步骤如下。 1. 剪切组织 先将所取得的组织,用D-Hanks ...
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多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine)的配制、保存、使用总结
因为自己做PC12细胞培养,想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被,到园子里搜索了下,关于多聚赖氨酸的帖子不少,看了一些帖子,将大部分收集在此。个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题,这些帖子里面都解释了。注:我只是摘了一个帖子里某段或某句话。一般一段话来自某一位战友。一、常用的多聚赖氨酸包被可以用三蒸水,或者PBS,浓度一般为用0.1 mg/ml进行包被。二、其他常用包被方法比较( ...
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不同实验中 transwell 小室的选择和使用
Transwell 小室在细胞实验中很常用,共培养实验、趋化实验、细胞迁移、细胞侵袭以及药物转运实验都会用到,但小室的规格有很多种,不同的实验需要用到的小室规格也不同。根据 transwell 板的不同,transwell 小室可以分为 6 孔板小室、12 孔板小室和 24 孔板小室以及和 transwell 皿配套的 75 mm 直径的小室;根据孔径的不同,从小孔径到大孔径又分为 0.4μm 规格、3μm 规格、5μm 规格、8μm 规格,不同实验对小室孔径的要求也不一样。小于 3μm 孔径的 ...
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血清使用问题的总结
一、血清灭活问题。1、问:加到培养基中的血清必须灭活吗? 答:不是必须的,看做什么实验了。2、问:四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗?回答a:血清都是灭活是56℃30min。每次我都是这样灭活的。回答b:应该是分血清的吧,若已灭活,就不用灭活了,未灭活,最好还是要灭活的。 回答c:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养 ...
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