胰酶使用注意及贴壁细胞的消化
胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化:1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同) ...
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细胞的传代次数和间隔时间
问:复苏的肿瘤细胞传代多久后,弃之不用并解冻新的细胞?在传代的过程中, 有时细胞长得太满, 都开始死亡了才传,对细胞有什么不良的影响,有没有固定的传代间隔时间?答:rumex认为培养的代数因细胞不同而不同,肿瘤细胞培养两个月应该不会有问题,但培养的不好就另说了,细胞数量达饱和密度后,细胞遂停止增殖,进入停滞期。停滞期细胞虽不增殖,但仍有代谢活动,继而培养液中营养渐趋耗尽,代谢产物积累、pH降低。 ...
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Jurkat细胞(人外周血白血病T细胞)的传代
Jurkat细胞(人外周血白血病T细胞),是一种悬浮细胞。我的经验如下:1、培养液:RPMI1640,15%小牛血清,2%Na2CO3,1%HEPES,青霉素100IU/1ml,庆大霉素100IU/ml;2、培养条件:5%CO2,37度,30%湿度;3、细胞复苏:要快速将冻存管放入37度水中,不断轻轻摇晃,直到细胞完全溶解,加入10ml左右的培养液,800~1000rpm,10分钟离心,之后 ...
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贴壁细胞传代-消化过程(图示)
本文详细介绍了贴壁细胞传代的消化过程
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