将质粒DNA导入细菌的过程称为转化(Transformation)。此感受态细菌细胞在CaCl2低渗溶液中膨胀为球状(感受态细菌的制备,见前)。质粒DNA与CaCl2形成抗DNase羟基-磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经42℃短时间热冲击处理,促进细胞吸收DNA复合物。在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖。被转化的细菌中,外源基因得到表达。在选择性培养平板上,可选出所需的转化子(即含有质粒DNA的细菌)。 ...
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方法一:使用Vector NT 软件做分子实验,经常和不同的质粒打交道,了解各种质粒的图谱信息是必需的,invitrogen公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音,要想对质粒图谱了解更直观,安装这款软件是非常必要的。这款软件的软件包里面会包括invitrogen公司的所有质粒图谱信息和其他比较常见和经典的质粒图谱。方法二:查找质粒图谱的网站1. Vector Database(addgene)地址:http://www.ad ...
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摘要: 目前感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的方法制备即用低渗CaCl2溶液在低温(0℃)时处理快速生长的细菌从而获得感受态细菌.本方法的关键是选用的细菌必须处于对数生长期实验操作必须在低温下进行. 原理: 目 ...
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本文介绍了感受态细胞的制备原理及方法
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