换了不同浓度的IPTG，用不同温度，不同诱导时间都做了，但都没有我的蛋白，菌落PCR，双酶切，测序都是对的，为什么不表达呢？
做个mRNA，如果mRNA水平就有问题加融合伙伴，尝试在C端（优先）和N端加入融合伙伴，有时候是某些蛋白的mRNA在你的表达系统中不稳定
换载体或者换表达系统
你的蛋白是膜蛋白吗？如果是，或者你可以试试构建个domain mapping 的质粒看看表不表达
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