标签： 大肠杆菌 感受态细胞 制备
大肠杆菌感受态细胞的制备可应用于基因工程研究。
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带有外源DNA 的重组质粒，在体外构建后，导入宿主细胞，随着细胞的大量复制、繁殖，才能够有机会获得纯的重组质粒DNA，该过程称之为转化过程。受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，能容许外源DNA 的载体分子通过。
第一次离心后出现黑色物体，后面连续做了两次，都有，不知道是哪个环节出现了问题，严格的无菌操作
5 评论
大肠杆菌感受态细胞制备时的CaCl2浓度到底是多少呢？
感受态细胞制备时的CaCl2浓度，有说是0.1mol/L，比如《分子克隆》。有说是0.05mol/L。到底哪个好？实验室只有CaCl2·2H2O，没有无水CaCl2，可不可行？
1 评论
感受态制备过程中，如何将第一次离心后的菌体悬浮？
其他的步骤没问题。问题是如何将第一次离心后的菌体悬浮？书上说不能剧烈振荡，否则影响转化的效率。可是不剧烈的话，无法将菌体悬浮，怎么办？
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觉得 一般
..................
觉得 简单
这个实验我们小组的扩增的克隆都很好的。
还没做过，不过看师兄师姐做了几次，应该说不算难吧，但可能还是要自己做了才知道都有哪些细节需要注意呢
做了一年原核实验，都是买公司的感受态，从来没有自己做过！
步骤做起来简单，要成功还是要很细心的
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