甘草酸通过影响DNA损伤和凋亡增强顺铂在非小细胞肺癌细胞中的抗肿瘤活性

本研究旨在阐明甘草酸增强顺铂在非小细胞肺癌中抗肿瘤活性的机制。首先，用不同浓度的甘草酸（0.25–8 mM）或顺铂（10–160 µM）处理A549细胞48小时，以研究甘草酸联合顺铂对A549细胞体外的影响。随后，将A549细胞分为对照组（未处理）、CP组（20 µM顺铂）、GL组（2 mM甘草酸）和CP + GL组（20 µM顺铂 + 2 mM甘草酸）以阐明甘草酸的潜在机制。孵育48小时后，使用MTT和集落形成实验评估细胞活力和集落形成能力。使用流式细胞术分析凋亡水平和细胞周期进程，并使用western blotting评估凋亡和细胞周期相关蛋白。此外，使用彗星实验和western blotting评估DNA损伤和相关蛋白。结果显示，甘草酸和顺铂均以浓度依赖性方式降低A549细胞活力。在较高甘草酸浓度下，顺铂的半抑制浓度（IC50）较低，在2 mM甘草酸下IC50值约为35 µM。此外，甘草酸和顺铂的联合治疗协同降低了细胞集落形成能力，诱导了凋亡，并使细胞周期阻滞在G2期，与单独治疗相比显示出更大的疗效。此外，western blotting分析表明，与单独使用顺铂或甘草酸治疗相比，联合治疗显著增加了B细胞淋巴瘤2相关X蛋白、cleaved-caspase-3/caspase-3、γH2AX、磷酸化检查点激酶1和磷酸化p53/p53的蛋白表达水平，同时显著降低了B细胞淋巴瘤2、细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白依赖性激酶2和细胞周期蛋白依赖性激酶4的蛋白水平。本研究的发现表明，甘草酸通过调节DNA损伤和凋亡增强顺铂在非小细胞肺癌细胞中的抗肿瘤功效。