METTL3介导的SIRT1 mRNA m6A修饰通过增强细胞衰老抑制子宫内膜异位症的进展

背景：子宫内膜异位症（EMs）是功能性子宫内膜在子宫外异位种植，是不孕和盆腔疼痛的主要原因。作为一种基本的mRNA修饰，N6-甲基腺苷（m6A）参与多种病理过程。然而，m6A RNA修饰在子宫内膜异位症中的作用仍不清楚。本研究探讨METTL3介导的m6A修饰及其在子宫内膜异位症中涉及的机制。方法：通过RT-PCR分析EMs中主要的m6A调节因子。通过m6A-mRNA表观转录组微阵列和RNA测序评估METTL3的候选靶标和可能的机制。采用原代ESCs模型验证METTL3对SIRT1 mRNA m6A修饰的作用，并通过RT-PCR、Western blotting、MeRIP和RIP实验阐明其机制。通过CCK-8活力实验、Transwell侵袭实验、EdU增殖实验、伤口愈合迁移实验和衰老相关β-半乳糖苷酶染色阐明METTL3和SIRT1在ESCs中的潜在生物学机制。采用体内PgrCre/ + METTL3 −/−雌性纯合小鼠模型和裸鼠异种移植模型进一步研究METTL3介导的m6A改变对EMs的生理后果。结果：我们的数据表明，METTL3表达降低显著下调ESCs中的m6A RNA甲基化水平。沉默METTL3介导的m6A修饰在体外加速ESCs的活力、增殖、迁移和侵袭。m6A阅读蛋白YTHDF2结合m6A修饰诱导SIRT1 mRNA的降解。随后抑制SIRT1/FOXO3a信号通路激活，促进ESCs的细胞衰老，并在体外和体内抑制ESCs的异位种植。结论：我们的研究结果表明，METTL3介导的m6A甲基化表观遗传调控ESCs的异位种植，导致子宫内膜异位症的进展。我们的研究确立了METTL3-YTHDF2-SIRT1/FOXO3a作为子宫内膜异位症的关键轴和潜在机制。