LipoFiter3.0 转染试剂

产品简介

LipoFiter 3.0脂质体转染试剂( LipoFiter3.0 Liposomal Transfection Reagent )是一种适合于把质粒或其它形式的核酸,以及核酸蛋白复合物转染到真核细胞中的高效阳离子脂质体转染试剂。

产品优势

1、转染效率高，重复性好，操作简单。

2、无明显细胞毒性，用 LipoFiter3.0转染细胞后，对于大多数细胞 72 小时内不更换培养液无明显细胞毒性。

3、LipoFiter3.0对于贴壁细胞和悬浮细胞都适用，并且可以用于稳定表达细胞株的筛选。

操作流程图

如需查看完整、详细的产品使用说明，欢迎登录汉恒生物官网（www.hanbio.net），在[资源中心]板块获取【试剂说明书】高效转染试剂LipoFiter3.0。

与LipoFiter的定位差异

 

对比项	LipoFiter	LipoFiter 3.0
定位	通用基础款	高效升级款
普通细胞效率	高	高
难转染细胞效率	一般	显著提升
价格（1 mL）	¥1,230起	¥1,880起
适用场景	常规DNA转染	难转染细胞、高要求实验

 

感染效果

 

应用案例

中国农业大学客户发表于Molecular Cancer，IF=41.444

文章标题：A novel polypeptide encoded by the circular RNA ZKSCAN1 suppresses HCC via degradation of mTOR

使用方法：LipoFiter 3.0转染质粒

 

细胞转染试剂产品列表

 

 

常见问题

1.细胞转染试剂怎么选？

我们公司有各种不同的转染试剂可供大家实验需求。针对siRNA的转染可以选择RNA专用转染试剂RNAFit。针对质粒DNA的转染可以选择LipoFiter转染试剂，该转染试剂适用于普通细胞系转染，具有低细胞毒性的特点。高级版的LipoFiter3.0高效转染试剂，适用于普通细胞系和难转染细胞系，具有极高的转染效率。如果有慢病毒包装的实验需求，可以选择LentiFit慢病毒包装专用转染试剂，配合我们的慢病毒包装系统，可以获得高滴度的病毒液。

2.转染前细胞需要怎样的状态和密度呢？

细胞的生长状态会直接影响转染效果。转染前细胞最好经过1-2次传代，细胞良好的生长状态有助于提高转染效率。有些细胞系传代很多次还能够保证很高的转染效率，密度对转染效率的影响比较大。一般在转染时，贴壁细胞密度50%~70%为宜，悬浮细胞密度为2x10^6--4x10^6细胞/ml时效果较好。铺板细胞数目的增加可以增加转染活性和细胞产量，对于转染siRNA确保接种贴壁细胞密度在30%-50%左右，悬浮细胞密度为5x10^5--1x10^6细胞/ml，对于一些生长缓慢的细胞，接种密度可适当扩大2倍。

3.转染时是否需要使用无血清、双抗的培养基？

血清一度曾被认为会降低转染效率，在开始准备DNA和阳离子脂质体试剂稀释液时要使用无血清的培养基。血清中含有大量的蛋白质，在转染过程中，带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体/阳离子聚合物对核酸的吸附，影响转染效率。但在复合物形成后，在加入细胞中前可以加入血清。当然，最好是按照转染试剂说明书的要求来进行操作。双抗一般对于真核细胞无毒，但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性，使双抗可以进入细胞。这降低了细胞的活性，导致转染效率低。所以，在转染培养基中不能使用双抗，甚至在准备转染前进行细胞铺板时也要避免使用双抗。

4.转染效率低的原因是什么呢？

影响转染效率的因素主要有以下几点；细胞因素，细胞的状态对转染效率的影响较大。要确保细胞未被污染以及细胞处在对数期。如果是贴壁细胞的话，贴壁率应该在50%~70%。转染时细胞密度过高或者过低都会导致转染效率降低，乃至表达水平偏低。核酸因素，转染载体的质量也影响转染结果。如果DNA不纯，OD260/OD280<1.6，表示存在蛋白或者酚类污染，会影响核酸-转染试剂复合物的形成，从而降低质粒的转染效率。质粒抽提过程中如果存在内毒素会影响到细胞状态甚至导致细胞死亡，建议用无内毒素质粒抽提试剂盒进行质粒提取。转染条件，是否是最佳转染条件进行转染。正式实验前，一般需要根据说明书，设置一系列梯度对核酸/转染试剂比例进行摸索，选择最佳组合作为后续转染条件。

5.转染后出现细胞死亡是什么原因？

可能是细胞本身状态差，在进行转染实验刺激后也可能导致细胞死亡。应该在转染前调整好细胞状态，在转染实验过程中操作尽可能小心，减少实验操作对细胞造成不必要的损伤。用于转染的质粒DNA如果不纯，比如含有蛋白质、酚等污染，在进行细胞转染过程中进入细胞后也会影响到细胞的生长状态甚至导致细胞死亡。如果转染用的质粒含有内毒素，也会对细胞造成较大的毒性。