样本收集与分组
比较LC患者与恢复期对照的免疫参数。
纳入47例LC患者和41例健康对照,收集血清或血浆样本。
Seasonal Coronavirus-Induced Immunological Imprinting and Previous Herpesvirus Infections in Patients With Long COVID.
该研究为横断面队列研究,包括47例LC患者和41例对照,通过ELISA、Microblot-Array和PCR检测抗体和病毒核酸,并进行相关性分析,但缺乏功能验证实验。
长新冠患者队列 健康恢复期对照队列
LC患者47例,HC 41例,血清或血浆样本 SARS-CoV-2和季节性冠状病毒抗体检测(ELISA) 疱疹病毒DNA检测(PCR) ANA panel(44种)检测 CMV p65 IgG与FAS评分的Spearman相关性
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
比较LC患者与恢复期对照的免疫参数。
纳入47例LC患者和41例健康对照,收集血清或血浆样本。
测定SARS-CoV-2和季节性冠状病毒特异性抗体水平。
使用ELISA检测IgG、IgA、IgM抗体,使用Microblot-Array检测疱疹病毒抗体和ANA。
检测血清中SARS-CoV-2 RNA和疱疹病毒DNA,并评估ANA。
使用PCR检测多种病毒靶标,使用MBA检测ANA。
评估抗体水平与LC症状(疲劳和认知障碍)的相关性。
使用FAS和CFQ量表评估症状,并与抗体水平进行Spearman相关分析。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| ELISA检测 | SARS-CoV-2刺突蛋白 | Sino Biological | 40589-V08H4 |
| 刺突蛋白亚基1 | BPS Bioscience | 100730 | |
| 刺突蛋白亚基2 | ACRO Biosystems | S2N-C52H5 | |
| 核衣壳蛋白 | Sino Biological | 40588-V08B | |
| HCoV-OC43刺突蛋白 | Sino Biological | 40607-V08B | |
| HCoV-HKU1刺突蛋白 | Sino Biological | 40606-V08B | |
| HCoV-NL63刺突蛋白 | Sino Biological | 40604-V08B | |
| HCoV-229E刺突蛋白 | Sino Biological | 40605-V08B | |
| HCoV-OC43刺突蛋白S2 | Sino Biological | 40607-V08B1 | |
| HCoV-HKU1刺突蛋白S2 | Sino Biological | 40021-V08B | |
| 96孔Maxisorp板 | ThermoFisher | 442404 | |
| 吐温-20 | -- | -- | |
| 低脂奶粉 | Carl Roth | T145 | |
| HRP标记的单克隆抗人IgG | ThermoFisher | 05-4220 | |
| 多克隆抗人IgA | BioLegend | 411002 | |
| 多克隆抗人IgM | ThermoFisher | SA5-10293 | |
| TMB底物 | ThermoFisher | 34028 | |
| ETI-MAX 3000酶标仪 | Diasorin | -- | |
| PCR检测 | Emag核酸提取系统 | BioMerieux | -- |
| FastVirus预混液 | Applied Biosystems, ThermoFisher | -- | |
| ABI 7500 PCR仪 | ThermoFisher | -- | |
| Microblot-Array | EBV IgG MBA试剂盒 | TestLine Clinical Diagnostics | EBGMA96 |
| EBV IgM MBA试剂盒 | TestLine Clinical Diagnostics | EBMMA96 | |
| EBV IgA MBA试剂盒 | TestLine Clinical Diagnostics | EBAMA96 | |
| CMV IgG MBA试剂盒 | TestLine Clinical Diagnostics | CMGMA48 | |
| CMV IgM MBA试剂盒 | TestLine Clinical Diagnostics | CMMMA48 | |
| HSV1+2 IgG MBA试剂盒 | TestLine Clinical Diagnostics | HSGMA48 | |
| HSV1+2 IgM MBA试剂盒 | TestLine Clinical Diagnostics | HSMMA48 | |
| ANA plus MBA试剂盒 | TestLine Clinical Diagnostics | ANApMA96 | |
| MBA读取仪 | TestLine Clinical Diagnostics | ARCXIX096 |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 样本收集与处理 | LC患者和HC的纳入标准、样本类型(血清或肝素血浆)、储存温度-80°C 阅读提示:Methods, Study Population and Sample Collection |
| 抗体检测 | 抗原浓度、包被条件、血清稀释度、孵育时间、检测抗体浓度及来源 阅读提示:Methods, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) |
| 病毒核酸检测 | 核酸提取方法、PCR靶标基因、循环条件 阅读提示:Methods, Virus Polymerase Chain Reaction (PCR) |
| Microblot-Array | 试剂盒型号、血清稀释度、孵育时间、结果判读阈值(185 U/ml) 阅读提示:Methods, Microblot-Array |
| 统计分析 | 统计检验方法、多重比较校正方法(Benjamini-Hochberg)、显著性水平α=0.05 阅读提示:Methods, Statistical Analyses |