补体C3a通过TNF-α激活星形胶质细胞促进髓母细胞瘤进展

背景：髓母细胞瘤（MB）是儿童中最常见的恶性脑肿瘤。大约三分之一的MB患者仍无法治愈。因此，了解MB肿瘤发生的分子机制对于开发特异性和有效的治疗策略至关重要。我们之前的工作表明，星形胶质细胞构成MB的肿瘤微环境（TME），并在MB进展中发挥不可或缺的作用。然而，星形胶质细胞被调节和激活以促进MB的潜在机制仍不清楚。方法：利用自发发展MB的Math1-Cre/Ptch1loxp/loxp小鼠，分离原代MB细胞和星形胶质细胞，然后在体外进行给药和共培养。利用免疫组织化学检测MB切片中C3a的存在。通过免疫荧光染色评估MB细胞增殖。通过免疫荧光染色、Western blotting、q-PCR和ELISA评估C3a刺激的星形胶质细胞中GFAP和细胞因子表达水平。通过PCR和免疫荧光染色检测C3a受体和TNF-α受体的表达。通过Western blotting检测p38 MAPK通路激活。用C3a受体拮抗剂或TNF-α受体拮抗剂处理移植MB小鼠，以研究它们在体内MB进展中的作用。结果：我们发现补体C3a，补体激活后从完整补体C3释放的片段，在人和小鼠MB肿瘤组织中富集，其受体在肿瘤相关星形胶质细胞（TAAs）上高表达。我们证明C3a通过p38 MAPK通路激活星形胶质细胞并促进MB细胞增殖。此外，我们发现C3a上调星形胶质细胞中促炎细胞因子如IL-6和TNF-α的产生。应用C3a刺激的星形胶质细胞的条件培养基促进MB细胞增殖，而用TNF-α受体拮抗剂预孵育可消除这种作用，表明这是一个TNF-α依赖的事件。事实上，我们进一步证明，给皮下移植MB的小鼠施用选择性C3a受体或TNF-α受体拮抗剂可抑制体内肿瘤进展。结论：C3a在MB发展过程中释放。C3a通过p38通路触发星形胶质细胞活化和TNF-α产生，从而促进MB细胞增殖。我们的发现揭示了C3a介导的星形胶质细胞产生TNF-α在MB进展中的新作用。这些发现暗示靶向C3a和TNF-α可能代表人类MB潜在的新型治疗方法。