酵母双杂交筛选

pulldown 服务项目 客户提供 最终交付 文库构建 组织/细胞 滴度在1×10cfu/mL以上的酵母文库菌液；文库PCR鉴定结果图片(阳性率在90%左右) 文库筛选 蛋白序列/基因序列/质粒 筛选过程中的全部原始图片；筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果 案例展示 相关

酵母双杂交 原理： 酵母双杂交系统的建立基于对真核生物调控转录起始过程的认识。酵母转录因子GAL4含两个结构域：DNA结合功能域和转录激活结构域，前者可识别DNA上的特异序列，并使转录激活结构域定位于所调节基因的上游，后者同转录复合体的其他成分作用，启动相应基因的转录。将编码DN

GST pulldown实验是一个有效验证酵母双杂交系统的体外试验技术。将靶蛋白质-GST 融合蛋白质亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，作为与目的蛋白质亲和的支撑物，充当一种“诱饵蛋白质”，目的蛋白质溶液过柱，可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白质(目的蛋白质)”，洗脱结合物通过 SD

酵母双杂交系统（Yeast two-hybrid system），是将待研究的两种蛋白质分别克隆（融合）到酵母表达质粒的转录激活因子（如GAL4等）的DNA结合结构域（DNA-BD）和转录激活域（AD）上，构建成融合表达载体，从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。 孚博交付 完

，DUALmembrane 技术突破了传统酵母双杂交的局限，扩大 了酵母双杂交的应用范围。DUALmembrane 技术在传统的酵母双杂交系统的基础上，巧妙地利用分离的泛 素系统（split-ubiquitin）进行蛋白质相互作用的筛选。 我们拥有多年的文库构建经验，已完成数千个各

细胞体内研究抗原和抗体的相互作用等等。 服务内容： 目前我们可提供适用于浆蛋白、核蛋白及膜蛋白酵母双杂交实验服务的两套系统，包括：Clontech GAL4-based two-hybridsystem适用于诱饵蛋白为浆蛋白、核蛋白，StratageneCytotrapPsos s