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动物活体光学成像
动物活体光学成像
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实验方法
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动物实验-小鼠活体光学成像
一、检查设备仪器主要包括动物活体成像系统、气体麻醉系统等,检查仪器设备,必须使其处于正常运转状态,以保证实验顺利进行。二、注射底物如果进行生物发光成像,需在麻醉前注射荧光素底物。动物腹腔注射荧光素,最佳开始检测的时间是注射后 10min,荧光素的最适用量是 150mg/kg,即体重 20g 的小鼠需要 3mg 的荧光素。三、动物麻醉光学成像可选用注射麻醉药剂和气体麻醉,注射可用水合氯醛或戊巴比妥钠
模式动物的麻醉操作与处死方法
实验动物的麻醉:常用的全身麻醉药从物理性质上可分为挥发性麻醉剂,如乙醚、氟烷、甲氧氟烷等;非挥发性麻醉剂,如巴比妥类、氯胺酮、水合氯醛、安定和一些新型的复合麻醉剂,如速眠新、速麻安等。从麻醉途径上可分为吸入性麻醉剂,主要为上述的挥发性麻醉剂;静脉注射麻醉剂,如戊巴比妥钠、氯胺酮等;肌内注射麻醉剂,如速眠新、速麻安、安定等。从作用机制上,可分为中枢抑制性麻醉剂,如乙醚;镇静催眠药,如巴比妥类麻醉剂;
常规注射方式——皮下注射、肌肉注射、静脉注射、动脉注射
在动物实验中,为了观察药物对机体功能、代谢及形态引起的变化,常需要将药物注入动物体内。给药的途径和方法多种多样,可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型、剂量等情况确定。
动物发光标记法
活体生物发光成像技术的原理:在小型哺乳动物体内利用报告基因(荧光素酶基因)表达所产生的荧光素酶蛋白与其小分子底物荧光素在氧、Mg2+ 存在的条件下消耗ATP发生氧化还原反应,将部分化学能转化为可见光能释放。因此只有在活细胞内才会发生发光现象。并且光的强度与标记细胞的数目线性相关。
发光检测实验
实验应用:1.水质毒素检测;2.基于水母素的 Ca2+ 浓度测定;3.ATP 发光检测;4.快速筛选阳性细胞或阳性克隆;5.绘制标记物的发光梯度或曲线;6.细胞生物发光效率测试。
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