动物实验-小鼠活体光学成像

一、检查设备

仪器主要包括动物活体成像系统、气体麻醉系统等，检查仪器设备，必须使其处于正常运转状态，以保证实验顺利进行。

二、注射底物

如果进行生物发光成像，需在麻醉前注射荧光素底物。动物腹腔注射荧光素，最佳开始检测的时间是注射后 10min，荧光素的最适用量是 150mg/kg，即体重 20g 的小鼠需要 3mg 的荧光素。

三、动物麻醉

光学成像可选用注射麻醉药剂和气体麻醉，注射可用水合氯醛或戊巴比妥钠等进行腹腔注射。

气体麻醉可釆用异氟烷吸入性麻醉药剂，麻醉诱导和复苏均较快。大小鼠一般使用浓度为 2% 的异氟烷与氧气混合使用。

四、摆放小动物

成像时可将小动物麻醉后直接摆放至设备的动物平台上，，将待检测部位朝向上方［相机镜头的方向］,一般采取仰卧位。

五、检査位置

关闭暗箱门，点击软件的预览功能，以确定小动物位置是否在视野中央，可在视野内并排摆放多只小动物。

六、设置拍摄参数

根据实验要求选择相应的滤光片组，生物发光成像只需设置曝光时间和 Binning 值。荧光成像则根据荧光物质种类选择相应激发光和发射光滤光片。

七、图像处理

曝光结束后获得图像，系统会进行明场图和发光图或荧光图融合，调整灰度优化显示效果，并进行 ROIs 定量分析。