WB 实验是最简单最基础最直观检测目标蛋白的手段,所以做生物研究的几乎都要接触,做好WB,就成了大家必修的一课。凡事预则立,不预则废。WB实验前,先在头脑里预演一下将要进行的WB实验,实操时就会免去过度的手忙脚乱。
本次研讨会将通过介绍CST Western Blot标准操作步骤,向您阐释WB操作中的关键点及注意事项,特别是影响最终结果呈现的样本制备和抗体孵育与检测。通过真实失败案例,如无信号、高背景、条带大小不正确、条带弯曲拖尾等,分析WB常见的问题及原因,并提供相应的解决策略。
免疫印迹又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中 的某种蛋白的方法。其基本流程是先将待检测样品溶解于含有去污剂和还原剂的溶液中,经过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离各组分,然后通过印迹技术把分离样品几乎原位、定量转 移到 NC 膜上。随后用特异抗体与 NC 膜上的靶抗原反应,结合上的抗体可用与辣根过氧化物 酶或碱性磷酸酶偶联的抗免疫