实验问答

22,383,400 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问完全成熟的DC细胞贴壁吗？

dxyc42u

DC细胞在生长过程中逐渐由贴壁生长变成半悬浮, 悬浮状态生长。

3 回答2059 围观

问请问肺结节小鼠模型怎么建立？

huarenqiang5

方法:1 细胞培养及处理将小鼠Lewis肺癌细胞置于含10%胎牛血清及高糖DMEM的完全培养基中，置于37℃、5% CO2培养箱中培养，每1～2d更换培养液1次，每3 d用0.25%胰酶消化传代一次。细胞汇合率达90%时(如图2)，收集细胞，离心去上清，加入PBS吹打，使细胞悬浮于PBS中，台盼蓝染色细胞活力测定大于95%，并进行细胞计数，调整细胞浓度为4×107/mL的细胞悬液备用。2 注射前M

2 回答3384 围观

问小鼠胸主动脉内皮细胞好养活吗？

loveliufudan

以下是一些建议来提高原代小鼠胸主动脉内皮细胞的存活和培养成功率： 1. 保持无菌操作：在培养过程中，始终确保无菌操作。在更衣柜下进行操作，使用无菌培养器皿、耗材和培养试剂。 2. 注意供应商建议：根据供应商提供的说明书或建议，了解购买的原代细胞的特性、存储条件和培养建议。遵循供应商的指导进行操作和培养。 3. 快速转移和适当处理：购买细胞后，尽快进行转移和处理。按照供应商的推荐方法和培养基组合处理

3 回答401 围观

问请问下各位老师，wb结果一边粗一边浅可能是哪些原因呢

loveliufudan

可能由以下原因引起： 1. 不均匀的负载：在进行蛋白负载时，如果样品在凝胶上分布不均匀，可能导致一侧的蛋白负载较高，而另一侧较低。这会导致一侧的蛋白条带更粗更浓，而另一侧则较为淡薄。 2. 不均匀的电泳条件：在进行电泳过程中，如果电流分布不均匀或电场强度不稳定，也可能导致一侧的蛋白条带较为粗暗，而另一侧较为模糊或浅。 3. 不均匀的转移：在进行半湿式转移或湿式转移时，如果蛋白质的转移效率不均匀，可

3 回答2048 围观

问原核表达，加不加IPTG都能表达

loveliufudan

在您进行原核表达时，有一些可能的原因导致您无论是否添加IPTG都能观察到目标蛋白条带的出现： 1. 自发性诱导：有些表达载体或宿主菌株在特定条件下可以自发表达目标蛋白，而不需要外源性诱导剂如IPTG。这可能是导致您观察到目标蛋白条带的原因之一。这种自发性表达可能是由于一些突变或其他因素导致的。 2. 泄漏表达：宿主菌中的T7 RNA聚合酶可能存在泄漏表达的现象，即在未添加IPTG的情况下，T7 R

1 回答5077 围观

问请问摇菌后pcr基因鉴定，出现的条带比目的条带短，并且不止一次是怎么回事？

loveliufudan

可能有几个原因： 1. 引物设计问题：检查所使用的引物序列是否正确，并确保引物序列与目标基因序列匹配。如果引物序列存在错误或与目标序列不匹配，可能会导致扩增产物大小不符合预期。 2. PCR条件优化：优化PCR反应条件，包括温度梯度、延伸时间和循环数等，可以尝试不同的温度梯度或延伸时间来优化PCR反应，以获得更准确的扩增产物大小。 3. DNA模板质量和浓度：确保所使用的DNA模板质量良好，并且在

3 回答3512 围观

问组织和细胞跑WB匀浆后需要加裂解液～为什么组织做ELISA 做匀浆即可？匀浆能提取蛋白吗

loveliufudan

对于细胞和组织的蛋白提取，常用的方法是使用裂解液。裂解液中含有蛋白酶抑制剂和蛋白分解酶，可以破坏细胞和组织的结构，释放出蛋白质。对于细胞，裂解液的使用可以有效破坏细胞膜和细胞器，并释放细胞内的蛋白质。裂解液中的蛋白酶抑制剂可以防止蛋白质的降解，保持其完整性。而对于组织，裂解液同样可以破坏组织结构，释放细胞内的蛋白质。组织的匀浆操作主要是将组织打碎，增加表面积，以便裂解液更好地与组织接触，促进蛋白质

3 回答2212 围观

问IFN-γ溶解需要用添加1%BSA的无菌水溶解，求问如何添加BSA，如何保证BSA无菌？

loveliufudan

要添加1% BSA（牛血清蛋白）到溶剂中，您可以按照以下步骤进行操作，并采取措施以确保BSA的无菌性： 1. 准备无菌BSA溶液：购买或制备1% BSA的无菌溶液。商业上提供的BSA常规都是无菌的，而自制的溶液需要在制备过程中注意无菌操作。 2. 无菌操作环境：在无菌条件下进行操作，如在无菌操作台上或已经消毒的实验室台面上。 3. 环境准备：清洁并消毒操作区域，使用酒精或其他适当的消毒剂。确保实验

1 回答758 围观

问求有效果的替莫唑胺

晓雨知春来

可能是您使用的替莫唑胺不纯，替莫唑胺是一种非常敏感的化合物，即使有微量杂质存在也可能降低其疗效。如果您对替莫唑胺的纯度不确定，可以请实验室进行检测。

3 回答399 围观

问请问此大鼠肺脏HE病理情况

sswei

脂肪在HE染色下溶解，形成空泡。

4 回答1218 围观

问行为学实验评估

dxyc42u

一般没有先后顺序之分，观察小鼠状态，恢复正常后即可进行下一项实验

3 回答559 围观

问小鼠原代滋养层细胞提取

sswei

磁选法：利用磁珠与特定抗体的结合来实现对目标细胞的选择性分离，较为快速和简便，但需要针对磁珠和抗体进行选择和优化。差速离心分离法：将组织通过差速离心，可以分离出不同密度的细胞，能够获得特定组织的细胞，但相较于其它方法分离效率较低。

4 回答981 围观

问您好，我想请教下用于WGA染色的小鼠心脏切片厚度多大呢

loveliufudan

对于小鼠心脏切片的厚度，常见的建议是使用4-10微米的厚度。选择适当的切片厚度是根据实验需求和研究目的来确定的。较薄的切片可以提供更高的分辨率，适用于细胞级别的观察和分析。然而，较厚的切片可以提供更多的组织结构信息和三维视角。

3 回答862 围观

问DiR-exosome

loveliufudan

以下是一般的步骤概述，供您参考： 1. 准备外泌体：收集您感兴趣的细胞系或生物样本，并进行外泌体的分离和纯化。这可以使用不同的方法，如超速离心、尺寸排除层析或商用试剂盒。 2. DiR染色：将分离得到的外泌体与DiR染料进行共孵育。DiR是一种近红外发光的染料，可以被外泌体摄取。 3. 清洗和纯化：通过洗涤和离心等步骤，去除未结合的DiR染料，以确保外泌体的纯度。 4. 活体成像：使用近红外光学成

1 回答1244 围观

问结合传递

loveliufudan

要成功进行结合传递实验，有几个关键因素需要考虑： 1. 适当的转染试剂：选择适合你的细胞类型和实验目的的转染试剂。不同的细胞类型和试剂之间可能存在差异，因此需要进行优化和测试。 2. 合适的转染条件：优化转染条件，包括转染试剂和外源DNA或RNA的浓度、转染时间以及细胞密度等因素。这些条件的优化可能需要进行多次尝试和调整。 3. 目标细胞类型的适应性：不同细胞类型对结合传递的适应性有所差异。确保选

1 回答365 围观

问膜片钳记录不出来电流有些什么原因呢

loveliufudan

以下是几个可能的原因： 1. pH值校准问题：pH值的校准对于膜片钳实验非常重要。如果pH值未正确校准或达到所需的水平（例如7.4），可能会影响膜片的性质和膜蛋白的功能，从而导致无法记录到电流信号。确保正确校准pH值并使用合适的缓冲液是非常重要的。 2. 膜片质量和清洁度：膜片的质量和清洁度对于成功记录电流信号至关重要。确保膜片没有破损、没有杂质以及正确的封接是非常重要的。 3. 蛋白质的状态和稳

1 回答621 围观

问小鼠大脑CD31染色求助

晓雨知春来

血管染色，较薄的切片有助于减少背景信号和提高分辨率。你可以尝试使用更薄的切片，如6-8um，可以提高图像质量。

3 回答1313 围观

问PCR扩增，长度符合预期，但是测序回来的序列经对比后，不符合要求。

loveliufudan

出现目的片段与预期不符的情况可能有以下几个可能原因： 1. 污染或混合：在连接载体和转化涂板的过程中，可能存在外源性DNA的污染或混合，导致测序结果显示的不是您所期望的目的片段。这可能是由于工作台、试剂、PCR管或其他实验室环境中存在其他DNA片段的污染所致。为了避免这种情况，建议在实验室操作中严格控制污染，注意无菌操作，并避免试剂和操作工具的交叉污染。 2. 扩增过程中的错误：在PCR扩增目的片

4 回答739 围观

问小鼠便秘的表型实验怎么做？

loveliufudan

在小鼠便秘的表型实验中，可以考虑使用"全肠道运输时间"来表征便秘情况。全肠道运输时间是指从小鼠口服标记物（如胭脂红）到其出现在粪便中的时间。以下是一般的实验步骤：1. 实验组设计：将小鼠分为对照组和实验组。对照组接受正常饮食和生活条件，而实验组可能接受诱导便秘的处理（如特殊饮食、药物等）。2. 标记物摄入：给实验组小鼠口服含有标记物（如胭脂红）的食物或溶液。确保标记物与饮食或溶液充分混合，以确保均

3 回答1184 围观

问0.6M NaCl-20mM Tris-马来酸缓冲液（ph=7.0）怎么配制？

loveliufudan

要配制0.6M NaCl-20mM Tris-马来酸缓冲液（pH=7.0），您可以按照以下步骤进行： 1. 准备所需试剂：NaCl（分子量为58.44 g/mol），Tris（分子量为121.14 g/mol），马来酸（分子量为116.07 g/mol）。 2. 使用分子量计算所需质量：根据所需浓度和体积，计算所需的NaCl和Tris的质量。假设您想配制1升缓冲液，则0.6M NaCl需要0.6

3 回答2988 围观

关于丁香通

公司信息

个人用户

企业机构

无忧采购轻松科研

提问

扫一扫

实验小助手

扫码领资料

反馈

TOP

打开小程序