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实验问答

31,163,475 科研人在看

问生物结皮土壤中藻类的提取和培养方法？

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生物结皮藻类提取：取结皮样品加无菌水震荡，梯度稀释后涂布BG-11平板，20-25℃、光强30-50 μmol/m²/s、12h光暗周期培养。关键试剂：BG-11培养基、琼脂。注意：结皮易碎，采样勿压实；藻种生长慢，需2-4周观察。杂菌污染是常见失败点，建议加抗生素或采用湿法稀释涂布。

1 回答55 围观

问家人们，问一下配置碱裂解法质粒提取的重悬液用盐酸调ph用的稀盐酸还是浓盐酸啊？

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1 回答81 围观

问测羧甲基壳聚糖的取代度，若先加入过量的碱液，再用酸滴定，各突跃点代表什么

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酸滴定法中，过量碱被中和后，羧基（pKa~4）先于氨基（pKa~6.5）被滴定，第二突跃为羧基，第三突跃为氨基。部分样品第一突跃不明显的原因：1）样品纯度低，干扰离子多；2）脱乙酰度低，氨基少，羧基/氨基比例失衡；3）取代位点不均一（O-取代/N-取代混合）；4）碱过量不足或CO2干扰。建议：氮气保护下操作，控制碱过量20-50%，改用0.01M低浓度酸，或换用电位滴定仪（如Metrohm）替代指

1 回答100 围观

问LPS诱导BEAS-2B炎症，测CCK-8文献是下降，为什么我是增殖，该如何改进呀

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可能原因：1) 8000/孔密度偏低，LPS促增殖而非毒性；2) 无血清条件下细胞对LPS敏感性改变；3) 血清批次差异。改进：密度提至1.5-2万/孔；换用含1-2% FBS培养基稀释LPS；增设阳性对照如TNF-α或IL-1β；延长刺激至48h；检测上清IL-6/IL-8验证炎症激活。关键试剂：超纯LPS-EK Ultrapure (Invivogen)更可靠。注意：CCK-8检测前弃旧液换新

1 回答84 围观

问上海PCR实验室，P2实验室适配哪种实验场景？

65 围观

问WB快速电泳液使用体验，聊聊实验室耗材副业

59 围观

问密旋链霉菌和胶质芽孢杆菌拮抗实验

43 围观

问求助各位大佬，SA与GAL一直偶联不成功，试了戊二醛和NHS/EDC，都不太行，有什么好用的方法吗？

63 围观

问想问一下种子大肠杆菌菌液4度放久了会导致之后就算转移到新鲜培养基过夜培养产量也会变低吗，最近提出来的浓度只有以前的一半了

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会。4度长期存放导致菌体进入停滞期或死亡，活菌数下降。建议：1. 从新鲜平板挑单克隆；2. 37度复苏1-2小时后转接；3. 控制起始OD600 0.05-0.1；4. 检测培养基抗生素活性。关键：定期划板保种，避免直接用4度菌液连续接种。

1 回答107 围观

问4T1 细胞不可逆电穿孔实验中，用cck-8试剂测定存活率均较低且没有规律，有什么可能的原因？

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可能原因：1)电穿孔后细胞膜损伤导致CCK-8进入胞内被还原，假阳性死亡；2)脉冲参数（脉宽、次数）未说明，能量过高；3)细胞密度不均或电击杯内温度升高；4)CCK-8孵育时间不足。建议：改用台盼蓝或Calcein-AM/PI双染流式检测；电穿孔后冰上操作；设置未电击对照；确认师兄实验的脉宽、脉冲数是否一致。

1 回答151 围观

问血浆样本2-AB标记上UPLC后,2分钟左右出的峰有点怪，这出的峰是什么？后面没有出糖基峰，这是什么原因？

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2 min峰为过量2-AB标记试剂或还原剂（如NaBH3CN）未除尽的强极性杂质，拖尾提示过载或溶剂效应。无N糖峰最可能是PNGase F酶切失败：血浆IgG糖基化位点在Fc段，需保证变性条件（SDS 65°C 10 min）和NP-40存在。建议：1) 跑SDS-PAGE确认条带位置；2) 换用Glyko或NEB PNGase F；3) 用2-AB标品跑对照；4) 检查HILIC柱平衡和乙腈比例

1 回答122 围观

问大鼠胃溃疡模型中胃的取材和he染色具体操作及细节?

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取材：大鼠麻醉后开腹，结扎贲门和幽门，4%多聚甲醛灌胃固定30min，取全胃沿大弯剪开，平铺固定24h。HE：常规脱水、石蜡包埋、4μm切片，苏木素5min，盐酸乙醇分化，伊红2min，中性树胶封片。关键：灌胃压力不宜过高，避免黏膜脱落；固定不充分易致组织脆裂。动物实验需伦理批件。

1 回答63 围观

问大鼠胃溃疡模型中胃的取材和he染色具体操作及细节?

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取材：麻醉后开腹，结扎贲门和幽门，注入4%多聚甲醛10ml固定10min，沿大弯剪开，平铺拍照，取溃疡及周围组织。HE：常规脱水、石蜡包埋、4μm切片，苏木精5min，盐酸乙醇分化，伊红2min，中性树胶封片。注意：固定不充分易致组织自溶；溃疡区需垂直于黏膜面切片。动物实验需伦理审批。

1 回答64 围观

问想问一下质粒小提提取出来的质粒浓度虚高是什么原因呢?

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常见原因：1）RNA未除尽，建议加RNase A 37℃消化10 min；2）蛋白残留，A260/A280偏低，需酚氯仿再抽提；3）基因组DNA污染，A260/A230异常，延长碱裂解时间勿剧烈震荡；4）测量误差，换NanoDrop基线校准或Qubit荧光定量复核。

1 回答114 围观

问多糖和黄酮共价结合共价键检测方法

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建议采用FTIR检测特征峰位移或消失，如多糖羟基峰减弱、黄酮羰基峰变化；结合NMR分析化学位移变化确认连接位点；XPS可检测元素结合能变化；必要时用酸水解后HPLC-MS分析连接方式。注意样品纯度要高，避免非共价结合干扰，建议设置物理混合物对照。

1 回答90 围观

问皮下荷瘤后长成长条状或者变成两个小瘤子是什么原因？

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长条状或分叶瘤常见原因：1)接种时细胞悬液沿皮下组织间隙扩散，形成条索状生长；2)多点接种或细胞团聚集导致分叶；3)瘤体生长受筋膜或皮肤张力限制呈不规则形态。改进操作：使用1mL注射器配26G针头，单点缓慢注射50-100μL，进针后回抽确认无血再推注，拔针后轻压针孔防止反流。细胞悬液浓度建议1×10^7/mL，冰上操作减少细胞成团。注意：瘤体形态不影响多数实验，若需规则瘤体可在接种后第3-5天触

1 回答100 围观

问我没有完成的心电图图片？急用

151 围观

问求助spss如何安装下载呢?

128 围观

问磷钨酸负染法电镜图片中存在图中气泡状伪影，请问知道形成原因吗？应该如何避免呢？

294 围观

问大鼠低颅压模型的相关问题咨询

347 围观

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