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问关于免疫荧光实验固定步骤的提问测试

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问越权验证测试提问：跨账号访问校验？

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问蛋白组学前处理的试验方法和步骤以及如何规避质谱中出现的假阳性信号。

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问消毒效果评价指示菌(大肠杆菌8099)（布片载体）可以用于紫外线消毒器的杀菌效果评价吗？

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问细胞冻存复苏的注意事项有哪些？

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问用移液枪吸取SDS-PAGE的溶液时喷枪，请问该怎么清理枪口

dxy_16u7d2b

建议改用Western blot或ELISA检测蛋白水平。若坚持IHC，可尝试：1)换用更高亲和力抗体；2)抗原修复（柠檬酸钠pH6.0或EDTA pH9.0，高压锅2min）；3)延长一抗孵育（4度过夜）；4)增强信号（TSA放大系统）。关键：设置阳性组织对照排除抗体问题。注意样本固定时间不超过24h。

1 回答36 围观

问请问为什么单纯疱疹角膜炎模型小鼠症状不会消退

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问家人们，想问一下为什么提高拷贝质粒的时候挺正常的，但是提低拷贝就比预期偏低呢？

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问有人知道chip后面QPcr的流程嘛

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问TMB溶液不显色的原因

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问细胞凋亡检测试剂怎么选择呢？

我是金博士

细胞凋亡检测试剂已经是常规试剂了，选择没那么复杂。国产的多是买的国外的自己进行分装，实验试剂这东西，经费少的话可以试试国产，经费足或者对结果要求高建议还是就直接用国外的好。如果你仅仅是一般地细胞凋亡，可以用Annexin V-FITC&PI，这个凯基公司有的，我用过。好像是20T，5-600RMB。如果你还涉及到了细胞内本身表达报告基因,诸如(E)GFP之类的，你可以买BD公司的Annex

2 回答2820 围观

问大肠杆菌感受态细胞制备时的CaCl2浓度到底是多少呢？

我是金博士

我们用0.1 mol/L，参照分子克隆的来。用CaCl2·2H2O可以，只要浓度一样就行了。

1 回答4498 围观

问细胞传代消化时间过长，消化不下来，这样会对细胞有损害吗？

zyj0630

消化时间过长对细胞的呼吸酶和膜蛋白有损害作用，可以通过拍打细胞培养瓶的物理手段来缩短消化时间。但是个人认为你描述的情况，即本来这种细胞消化时间没那么长，培养时间过长再传代时消化时间变长，这个细胞的有些性质可能已经发生变化了……后续实验中使用不是很好。

1 回答5110 围观

问在各个序列相上呈现什么样的密度可以考虑为脊髓瘤呢？

我是金博士

1、脊索瘤的诊断特征：有不规则肿块，形态欠规整。在T1 加权图像上呈低信号，在T2加权图像上呈不均匀高信号。2、脊索瘤可以与鼻咽癌、脑膜瘤、颅咽管瘤以及软骨瘤鉴别。鼻咽癌起源于咽隐窝，信号强度较均匀，很少有钙化，有显著异常对比增强。颅中窝底脑膜瘤很少引起邻近骨的广泛破坏，T2WI 图像呈等信号甚至低信号，具有十分明显的异常对比增强。颅咽管瘤在T1WI 与T2WI 图像信号强度变化幅度大，增强较少见

1 回答1210 围观

问质粒怎么都提不出来，该用哪种方法？

琴琴小贝

分支杆菌中的质粒提取：采用经典的碱裂解法。取4.5 mlEP管一支，加0.5 ml菌液，加入1 ml溶液1（15％蔗糖、25 mMTriscl pH8.0、10 mMEDTA pH8.0)，隔时加入溶菌酶，终浓度10 mg/ml，小心混匀。置于0度冰浴30 min，加入2 ml溶菌液2（0.2NNao 1%SDS）,0度冰浴10 min，加1.5 ml 3M NaAC小心混匀。1 000 rpm离

1 回答3871 围观

问大肠杆菌转化子有大有小，结果诡异，有何原因？

我是金博士

这情况我遇到过，尤其菌液PCR时候，有的强有的弱，有的带大小还不一样。我没有具体研究过啥愿意，但把大小一样的那个送去测序，一般都是正确的。关于你的这个情况，我分析【我自己的我也分析过】1、可能酶产物碎了一些，这样连进去就有大有小。如果你引物用的是在载体上的，那很可能扩出大小不同的。如果你引物就是在基因上的，这个好解决，你把退火温度逐渐提高，看看是不是那个不同片段就没了。2、有的时候发生了片段自连【

1 回答6766 围观

问克隆时发生突变了怎么办？

zhongmindai

回复突变可以用定点突变（site-directed mutation） PCR，但是周期也不会短。克隆的片段不长的情况下，多挑几个去测序，里面肯定会有对的。尽量选用具有更高保真性的酶扩增。

1 回答2867 围观

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