实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问为什么 Western Blot 的条带向两边扩散？

larixa

你的胶是失败的，胶的比例有无问题，微波炉加热是否充分，趁热倒胶时是否均匀，冷却凝结时是否静置，冷却时间是否足够。都可能出现小问题。从你的叙述来看，你的胶可能不止一处存在问题。先不要浪费你的样品，先研究一下怎样做出能用的凝胶。

13 回答10195 围观

问请问裂解细胞进行检测，最少多少动物量就可以完整检测一次

月亮先生

我用七八万的目的细胞群，也能做出荧光定量的实验。就是出峰可能晚了一点

3 回答1364 围观

问转膜内参不是很清楚该怎么办？

糖guo

也可以考虑放两张膜来转

3 回答2007 围观

问神经瘤细胞能直接放液氮罐冻存吗？

angell_202

神经瘤细胞不能冻液氮罐吗?为什么？如果是-80度直接放液氮罐，如果现准备冻存，按冻存步骤来。

1 回答1940 围观

问有用胎盘组织做RT-PCR的吗？

yhy_yun

你可以试试其他内参，例如U6等，胎盘组织和人体其他组织的成分是不一样的。

1 回答1336 围观

问我用多聚赖氨酸包被了，还是脱片很严重，请问有好的解决方法吗？

丁小燕

只有在用PBS洗涤时要轻柔，每一步都要轻柔才行！

1 回答1016 围观

问细胞免疫荧光用 4% 多聚甲醛固定，1% BSA 封闭，这两步可以不要吗？省去会有什么影响？

stellaff

“加荧光标记抗鼠抗体（第二抗体）工作液20ul，混匀振荡置4℃/30分钟（时间不能超过）。”请问这步必须是4℃/30分钟吗？时间不能超过，如果超过了会有什么影响？” 二抗不一定就是4℃ 30分钟，我们经常采用室温下避光孵育1小时，这样也可以得到较好的效果。细胞免疫荧光是需要固定的，根据目的蛋白的不同可以选择多聚甲醛或者丙酮，一般固定20分钟。封闭也是需要的可以减少非特异性背景。

1 回答2249 围观

问beta-actin条带灰度一致，但是宽度不一致？

我是金博士

说明上样量不均匀。

1 回答1515 围观

问请问大家：我扩增的时候出现两个峰，是不是引物的问题？

我是金博士

不一定，也有可能是引物设计的不好，可以提高下退火温度再看看

1 回答1035 围观

问请问标注的 primer B 和 C 一般需要多长的片段呢？

我是金博士

这个还是比较容易的，你要考虑下多设计几对引物，你可以搜索下overlap PCR引物设计注意事项，蛮多的。

1 回答3716 围观

问冻存的细胞可以先在-80°冰箱放几天再移入液氮吗？

我是金博士

理论上市不太有影响的，最好还是按要求哦

1 回答5831 围观

问为什么小分子没有转到膜上？

三儿的脚麻了

如果觉得自己的操作没有问题的话，我估计就是实验条件的问题。每次我转膜都是用的恒压，你可以尝试改变一下你的实验条件。比如：电压或者电流（但是那要取决于你是恒压还是恒流）。一点愚见！嘿嘿！加油！

1 回答1109 围观

问sds-page

我是金博士

煮过就没有问题了，已经变性了呀

1 回答646 围观

问为什么我的琼脂糖电泳跑胶总是出现笑脸或者皱眉条带？

我是金博士

不知道是啥笑脸图？如果说条带不均一，那很大程度上是配胶不均匀。我们一般都是微波炉中高热加热

1 回答3378 围观

问为什么经过酶切过后胶回收分子量变大了？

2874 围观

问为什么我的浓缩胶开裂了（导致样本渗入凝胶内）？

过年好

上样的时候，把玻璃板和胶之间撑开了，所以样品会渗到玻璃板和胶之间了。

5 回答2087 围观

问新手求助啊提出蛋白然后呢。然后呢

781 围观

问分子量27kd的 NGF的显色时间

805 围观

问山羊抗人的单克隆抗体可以直接注射到小鼠体内吗？

我是金博士

山羊抗人的单克隆抗体，这个是二抗，主要用来结合一抗的，跟你描述的不一样。

1 回答2612 围观

问WB做出来总是有杂带并且mmp-2带很细很细背景很高很高不知如何处理？

我是金博士

如果杂带不影响主带就没问题，WB中没有杂带的情况是很少的。

1 回答1701 围观

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