做免疫沉降能否使用不同公司生产的抗体？
xiongxiong321
各位前辈，我现在想测定目的蛋白的磷酸化水平，实验室拥有磷酸化抗体（sigma）和总蛋白抗体（santa cruz）但是抗体说明书所给出的条带大小不一样（sigma 40kDa santa cruz 62kDa）。我可以用两种不一样公司的抗体做IP么，比如用santa cruz的总蛋白抗体沉降后再做WB，分别用两种抗体检测总蛋白量和磷酸化蛋白量？如果可以的话是不是出现的条带位置也不一样，磷酸化在40 总蛋白在62？还是说必须用一种公司的抗体进行实验，十分困惑，求解，不胜感激。
6 个回答
EAjoyce
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不同公司的抗体识别的抗原表位是不一样的，如果目的蛋白在细胞内有过剪切或者其他修饰的话，不同抗体检测到的条带大小会差很多，建议查清楚抗体说明书：该抗体是否能做IP；其识别的抗原表位在哪里；然后再决定用何种抗体做IP比较合适
远古的早晨
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应用同一公司的比较好！
hjy130
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不能够。最好用同一个公司的产品！！
小型公主
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最好不要用不同公司的，同一产品不同批号还有不同呢，何况不同公司呢？
倪言
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只要使用的抗体是针对目的蛋白的，不是同一家的抗体是没关系的。
changhao6787
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能不能做IP要看抗体说明书，有适用范围；磷酸化和非磷酸化MW差不了这么多，基本是一致的，你可以看看sigma是不是对于截短的蛋白跑wb的，具体你目标蛋白的分子量（MW）你可以在NCBI上或是文献途径确定一下，没有要求鼻血用一种公司的抗体进行试验。
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