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问
转膜是电流异常升高是为什么?
无情伤流水
一般是配方问题 电流过大 转膜会出问题
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问
同一批MIX,同一条件,同一批PCR,同一块胶,同一电泳,为什么差别就这么大呢
wisdyadong
胶配的不均匀!
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问
wentern blot抗体孵育,PVDF膜上是否可以同时孵育不同种属来源的两种蛋白?
应用场景
即使是相同分子量蛋白,用li-cor odyssey的两个近红外荧光通道也可以同时孵育不同种属一抗,二抗,同时扫描曝光,类实验常见于磷酸化蛋白检测。
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问
WB的内参一直做不齐是什么原因?
张振1986
你的这个问题是非常常见的,就算在实验室专业做WESTERN的人员,也会遇到内参不齐的问题。单独上样可以出现,可以排除蛋白本身的问题,但混合一起加时却跑的不齐,最大的可能就是胶的问题,胶配的不均匀导致蛋白跑的不在同一水平。在就是抗体孵育问题,不知你是用孵育盒,还是用封膜孵育,一定要保证膜与抗体充分接触,保证孵育效果。三是显影剂是预混还是混合好的,注意混合比例,祝楼主早日跑出理想的条带。
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问
构建的原核表达载体不表达我的目的蛋白是为什么?
cpu2004
做个mRNA,如果mRNA水平就有问题加融合伙伴,尝试在C端(优先)和N端加入融合伙伴,有时候是某些蛋白的mRNA在你的表达系统中不稳定
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问
IC50,药物作用时间为多久呢?
bluesky219
要看你想要多久的IC50了,一般细胞毒药物求IC50是48h或72h,其他药物可以更长时间
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问
我用 SPF 鸡胚培养病毒,为什么结果老是分不出来?
览道
你是想分什么毒?这个很重要
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问
有那位高手跑过小鼠 IL-9 的定量 PCR,最近我在跑换了三个引物但仍然没跑出来该怎么办?
葫芦一笑
优化一下引物的温度或者条件, 还有设计的引物要在保守区域
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问
在生物学实验中,Panels 具体是指的什么?
great0722
panel是把感兴趣的基因放在一起,通过检测这些基因,来了解某种疾病的基因变异情况。与一代测序,PCR等技术相比,panel一次检测的基因数目非常多,通量高,价格便宜。panel测序的实现,是把感兴趣的基因用探针捕获下来,然后进行高通量测序,并进行数据的分析和解读。
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问
酶切没有条带,怎么办
我是金博士
PCR产物有条带吗?酶切时间有可能太长了,可以试着短点。
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问
CBA 的两种试剂盒检测结果之间是否有可比性?
吉小思
有可比性的,因为这两种盒子都是通过荧光强度反应浓度的。
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1807 围观
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问
哪里可以买到细胞侵袭实验(划痕实验)所用的放在六孔板里的十字形架子?
yus_us
我知道!不就是ibidi的耗材嘛~有2种哦,一种是伤口愈合插件,一种是4孔插件/4孔插件培养皿。
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问
大鼠在体灌注需要的多聚甲醛剂量是多少?
YRJ1995
成年大鼠每只250mL,前200mL快,后50mL慢
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问
PCT 降钙素原检测为什么不选择用赛默飞 B.R.A.H.M.S?
李梦涛
因为PCT-Q是半定量的,线性很窄,不能满足临床需求。另,自动化程度很低,相比梅里埃和罗氏,需要操作人员花费更多的精力。
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问
神经肌肉接头部位运动终板的显色
3775 围观
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问
悬浮细胞怎么做呢?
2960 围观
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问
平板克隆检测放化疗敏感性
1767 围观
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问
western Blot 检测心肌中,模型大鼠处死后取心肌组织,怎样提取细胞蛋白?
fmmuzhangfuyang
1.大鼠处死后剪取心脏,迅速用4摄氏度预冷PBS洗净血液,液氮速冻后移置负80摄氏度冰箱冻存2.提取时按照每毫克组织加入100ulRIPA裂解液,然后机械匀浆,12000r/min离心抽取上清,按照体积比1:4加入5乘loading buffer,95度10min,即可用于WB检测3.其余无特殊按照WB步骤进行
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问
spinner flask 细胞悬浮培养瓶如何清洗?
remote1129
spinner flask的瓶身和盖是要分开处理的。玻璃瓶身要用专用洗涤剂CIP100浸泡三小时或以上,然后用自来水和蒸馏水各洗三遍,特别要把洗涤剂清洗干净,烘箱烘干。塑料瓶盖用4%的NaOH溶液浸泡半小时,蒸馏水清洗干净,烘箱烘干,然后将瓶盖和瓶身组合好用锡箔纸包好,灭菌灭菌半小时就可以用了。
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问
集落是检测什么的呢?检测细胞多少嘛?
风Free001
将血细胞置软琼脂培养基进行培养形成的细胞集落数。集落形成单位的数量即为干细胞数量的量,因此是一种判定造血干细胞等分化能力的试验。
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