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问
PBS 容易把细胞冲散,细胞刚过夜是因为贴壁不牢吗?应该怎么改进?
五里云
划痕要用贴壁牢一点的细胞,一般只能用于上皮,纤维样细胞系。
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问
同一批MIX,同一条件,同一批PCR,同一块胶,同一电泳,为什么差别就这么大呢
wisdyadong
胶配的不均匀!
8 回答
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问
wentern blot抗体孵育,PVDF膜上是否可以同时孵育不同种属来源的两种蛋白?
应用场景
即使是相同分子量蛋白,用li-cor odyssey的两个近红外荧光通道也可以同时孵育不同种属一抗,二抗,同时扫描曝光,类实验常见于磷酸化蛋白检测。
4 回答
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问
做分子量270的蛋白电泳和转膜什么条件比较合适?
龟龟的花裤子
你好,我们跑的蛋白是220的 跑不出来 你的电泳和转膜的时间都是多少啊
2 回答
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问
WB的内参一直做不齐是什么原因?
张振1986
你的这个问题是非常常见的,就算在实验室专业做WESTERN的人员,也会遇到内参不齐的问题。单独上样可以出现,可以排除蛋白本身的问题,但混合一起加时却跑的不齐,最大的可能就是胶的问题,胶配的不均匀导致蛋白跑的不在同一水平。在就是抗体孵育问题,不知你是用孵育盒,还是用封膜孵育,一定要保证膜与抗体充分接触,保证孵育效果。三是显影剂是预混还是混合好的,注意混合比例,祝楼主早日跑出理想的条带。
3 回答
9839 围观
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问
神经元不长是什么原因?
天颜
1.消化时间长了!跟加什么关系不大。2.PLL铺板没?没有必死无疑!
2 回答
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问
蛋白分子量相近能跑两张膜吗?
应用场景
可以,跑两张膜,也可以考虑用一张膜两种荧光二抗检测。
1 回答
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问
我做了好几次 WB,为什么不是什么条带都没有,就是一片漆黑?
我是橙子橙
一片空白的情况下只有Maker条带
1 回答
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问
酶切没有条带,怎么办
我是金博士
PCR产物有条带吗?酶切时间有可能太长了,可以试着短点。
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问
我做得是贴壁细胞,可以不用多聚甲醛固定吗?
rayh9
1.活细胞对各种大分子通透性都差,不固定的话,后面的实验无法进行。多聚甲醛固定是常规选择,2.可以BSA封闭3.尽量创造类似条件,减少液体挥发4.尽量吸干,滤纸就行了,枪头吸不干
1 回答
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问
如何选用合适的分离胶?
cardiobalon
12%的分离胶没问题
1 回答
2759 围观
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问
大鼠在体灌注需要的多聚甲醛剂量是多少?
YRJ1995
成年大鼠每只250mL,前200mL快,后50mL慢
1 回答
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问
RNA 提取过程中 RNA 浓度过低是否会影响后续逆转录和 qPCR?
YJMYJ
太低了吧,至少得1000吧
1 回答
3922 围观
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问
SDS PAGE 蛋白质变性了吗?如果是,为什么可以结合变性了的蛋白?
奇妙能力g
1,转膜时候,自动复性? 2,,一抗结合的是线性表位?
1 回答
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问
PCT 降钙素原检测为什么不选择用赛默飞 B.R.A.H.M.S?
李梦涛
因为PCT-Q是半定量的,线性很窄,不能满足临床需求。另,自动化程度很低,相比梅里埃和罗氏,需要操作人员花费更多的精力。
1 回答
3851 围观
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问
请问用 6 孔板做划痕实验一般划几行?为什么要 marker 笔在底部画直线,会对拍照造成影响吗?
兵兵兵兵小
在底部画线是为了划痕时候能有一个大概得参考,拍照时候用酒精棉擦掉就好。
1 回答
2939 围观
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问
神经肌肉接头部位运动终板的显色
3929 围观
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问
WB内参总是跑不齐
应用场景
我可能您选用的内参表达不稳定,需要换内参,或用总蛋白做内参
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5010 围观
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问
为什么 Odessy 扫描后发现有的地方有蛋白,有的就是空白一片?
应用场景
是不是有可能转膜出现了问题?
1 回答
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问
集落是检测什么的呢?检测细胞多少嘛?
风Free001
将血细胞置软琼脂培养基进行培养形成的细胞集落数。集落形成单位的数量即为干细胞数量的量,因此是一种判定造血干细胞等分化能力的试验。
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