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请问如何提取 IgAN 患者血清中的免疫复合物?
云天昊
离子交换层析法提取IgG 常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素,以QAE-Sephadex最为理想,DE22、32、52也可应用。取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸盐缓冲液中平衡,将水分抽干,称湿重Ig加于10ml血清中,在室温30min后,离心或过滤除去离子交换剂。上清液再如此处理一次,即获得较纯的IgG。
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问
DNA 提取有杂带,有哪些办法可以提取得更干净?
wangyy1990
胶回收即可,一般我们实验室是这么弄 的,简单粗暴有效率。
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问
兔子试验为什么血液离心后呈淡红色?
wxdfrank
可能是溶血了。用空针采血后,不要直接把针头插入真空抗凝管中放血,这样容易导致红细胞破裂。应该吧针头取下,揭开真空抗凝采血管的盖子后,慢慢将注射器中的血液打入抗凝管中,可以避免。或者改用真空采血管专用的采血针。
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问
为什么要使用无血清培养基?
JMZ贝雷帽
避免细胞本身的增值对实验造成的影响
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问
umr-106 细胞培养结果完全不能用,到底是为什么呀?
wangyy1990
是的,“如果血清里里不含你药物的成分,且不和你药物相互作用,是可以加血清的。”。我们一般也是1%的血清,后期不加血清。
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问
同源性太高的基因,如何设计 TALEN 靶点?
jiayitu
这个确实很大一部分都被敲除了,还有一些别人没做出来的,我这个就是这个项目组的。。
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问
内参结果不均一的原因?
傲气的鸿雁
可能是你蛋白浓度测得不准,导致你加样误差太大。
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问
腹膜纤维化掉片严重怎么办?
laiyimei
你可以试试用水浴锅来做抗原修复,掉片会有很大的改善!
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问
大鼠平滑肌细胞培养,细胞不贴壁了是什么原因?
ptosir
你的细胞出现了比较明显的形态变化,有些变得更像上皮组织细胞了,如果不是细胞老化或细胞株本身有问题的因素,可能还是培养条件和培养方法的问题。说说你的具体培养方法吧
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问
为何我提取组织 DNA 后,DNA 的纯度很低?
我是金博士
可以多管浓缩,最后过柱子的时候,把很多管的都集中到一管。
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问
谁做过免疫细胞化学?
sunny218
将盖玻片用75%的酒精浸泡后,烤干酒精,再放入培养皿中,直接将细胞种到盖玻片上就好。
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问
质粒检测有多个条带
我是金博士
环状应该是单条带,可以用酶切,那就是多条带了,根据分子量大小来判断。
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问
人体皮肤组织用 Qiangen 的试剂盒提不出 RNA 是什么原因呢?
tiramisulydia
提取RNA要在通风的橱窗里进行,避免RNA酶的污染,尽量快速,应为过程中RNA会讲解。多次试验如果还是这样那就说明你的RNA的浓度确实比较低。
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问
为什么 WB 实验的目的条带总是多条?
ptosir
可能性1.你曝光的时候胶片或膜之间发生了轻微的错动;2.蛋白有部分降解;3.抗体与杂蛋白有非特异性结合,恰好杂蛋白分子量和目的蛋白分子量相近;4.蛋白出现了部分降解;如果以上可能性都排除了的话,恭喜你,很有可能发现了目的蛋白的蛋白修饰条带。当目的蛋白在细胞内有磷酸化、乙酰化等修饰存在时会产生卫星条带。
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问
求助western blot非特异条带非常多
hw26904636
我感觉抗体原因很重要。封闭1个小时应该够了。一抗孵育选择4度摇床过夜可以减少非特异性的表达
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问
急需 VE1 抗体,哪里有?急!
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问
如何从悬浮细胞中提取蛋白质?
云天昊
将细胞悬浮液收集后先离心,然后加裂解液裂解
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问
求问刚出生胎鼠的膝关节部位软骨如何取材?
danieldan08
胎鼠太小了,不好取材,直接酶消化好了
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问
密度梯度离心里 Conc.6% 是什很么意思?
clujyh430
分离液的浓度为6%,这个是以前的产品,sigma有最新的
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问
培养鸡胚成肌细胞第四天绝大部分细胞都死了是为什么?
yasha110
我虽然没养过,但是师兄一直在做,他的经验就是鸡胚胚龄很重要,大龄的胸肌分化过度,不好消化。
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