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问
细胞复苏后的第二天需要换液吗?
dxy_non823e7
因为细胞冻存液中的DMSO对细胞有害,虽然复苏的时候去掉了上清液,但是多少还会有残留,所以比较建议细胞复苏起来的第二天换液。但是我也试过第二天不换液,细胞长得也可以。
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问
细胞培养瓶中的细胞不贴壁是什么原因?
bamboopiggy
你这是什么细胞?感觉细胞是死了的,都圆了。
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问
.细胞成长曲线还有其他办法制作吗?
bamboopiggy
你可以用exel做,也可以用spss,graphpad做,都可以啊
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问
细胞解冻的相关问题?
ZPODY
推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的首选方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养
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问
关于细胞培养消化时间问题?
dxy_elk098he
消化中途可以多拿几次出来镜下观察状态,有大部分飘起来了就可以通过晃动摇下来剩下的。
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问
贴壁细胞传代相关问题?
bamboopiggy
建议把细胞传稀点,然后只换液,不传代,看细胞状况是否有改善
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问
细胞冻存放置于负80度冰箱一般能够保存多久?
未来9
肿瘤细胞一般在添加冻存液保存的情况下可以在-80度保存3个月内存活率一般可在80%以上,6个月以上大部分肿瘤细胞的存活率就会降低很快,即使复苏出来细胞是活着的,但是活性也会很低,对细胞状态影响很大。如果需要长期保存,最好是储存于液氮中,
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问
293T细胞出现如图线状物质,会随时间逐渐增多,影响细胞生长。求解决或者预防方法。谢谢
bamboopiggy
换好一点的血清试试,293t还是比较娇气的,血清不好,状态会差
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问
细胞培养碰上支原体污染该怎么办
此用户已注销
支原体污染细胞后,有必要清除支原体,常用方法有:1)对于非重要的细胞,如培养中的细胞、WCB的细胞等,将培养物与用过的培养基灭活后丢弃即可。对于较为重要的细胞,如来源珍贵或实验室中细胞保藏量较小等可以采用以下(2)-(8)的方法。2)用MRA处理:用支原体清除剂处理细胞,作用浓度为 25μg/ml,两周可以清除支原体。3)用清洗纯化法清除支原体污染的方法:细胞营养驯化→优质细胞群的筛选→细胞清
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问
电泳时为什么出现两条线,样品晕开了
bamboopiggy
如果能转膜过去,不影响显影,问题不大,我以前也遇到过,跟loading的染料有关
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问
请问各位,国产的CD45磁珠去除白细胞有效果比较好的吗?
一个小哭包
在血液中捕获和富集CTC细胞的方法是利用CD45免疫磁珠结合表达CD45抗原的白细胞,进行磁分离去除白细胞,此法可将去除大部分表达CD45的淋巴细胞,并将全部类型的CTCs富集分选出来。但是剩余的白细胞包括粒细胞(CD15抗原)和单核细胞(CD14抗原)还存在,剩余的细胞中仅能获得0.01%~1%的CTCs。
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问
细胞增殖检测方法的选择?
一个小哭包
总结来说,MTT法和CCk-8法适用于所有细胞。但如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求不是很高,从经济角度可以选择MTT法。如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求灵敏度非常高,并且希望非常便捷,在研究经费许可的条件下,建议选择使用CCK-8法。
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问
DMSO对冻存细胞复苏的影响?
whilt-shirt
需要立即去除DMSO,低温时DMSO对细胞有保护作用,常温下DMSO对细胞就有毒性了
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问
关于肿瘤细胞悬浮培养?
一个小哭包
主要是,正常细胞和癌细胞相比有接触抑制现象,使其只能贴壁生长;而且癌细胞的质膜结构发生了变化,间隙连接减少或者消失,细胞通讯受阻,发生成摞的生长
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问
lo2可以用高糖dmem培养吗?用1640长得太慢了感觉?
Xiong205
按照官方推荐培养基比较好,我做lo2不算慢,如果已经是太慢的程度,考虑是否是支原体污染,支原体污染的重要特征之一就是细胞生长速度明显变慢。可以检测一下培养液是否有支原体,如果有用biomy3清除14天左右。细胞状态会变好。
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问
基因测序的标本如何保存
一个小哭包
1. 植物组织:植物组织一般要求重量大于 4g。首先我们要准备好液氮预冷的无酶管,并做好取样器械的消毒和去RNA酶处理,尽量选取新鲜幼嫩、生长旺盛部位的样本进行迅速采集,然后用RNase-free水对样品表面进行快速的清洗,吸干表面液体之后放入无酶管中液氮速冻(时间不要太短哦),待彻底冷冻后,转移至-80℃冰箱保存。2. 动物组织:送样的重量一般要求在 2g以上。若在实验室中取样,做好器械的消毒和
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gateway clone实验老是失败,要么不长斑,要么长的斑提出来质粒无条带。想请教各位大佬是什么原因?
一个小哭包
培养条件,染菌问题。提质粒也有可能出现问题
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为什么用LPS诱导不出BV2细胞的炎症?
Eason老歌迷
应该是你的lps问题。LPS它的说明书上写的是:”在缓冲液或培养基中浓度为1 mg / ml的溶液在2-8°C的温度下稳定大约一个月。冷冻的最多可保存2年。 不建议重复冷融。 溶液应储存在硅烷化的容器中,LPS可以与塑料和某些类型的玻璃(特别是浓度<0.1 mg / ml)结合。 如果LPS浓度> 1 mg / ml,则对小瓶侧面的吸附可以忽略不计。“
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肿瘤种植失败的兔还能用吗
一个小哭包
不建议继续使用。有可能会对实验造成干扰,实验数据不正确
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问
如何给文献作者发邮件借文献中用的细胞系?
Eason老歌迷
如果是国外的,还得是自己学着做。如果是国内的可以试着找联系方式,发邮件问一下。
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