想问下中间细胞聚团的原因是什么

状态不好、老化的细胞，也可能会出现抱团生长的情况（比如换液不及时、长的太满才传代、污染等造成的细胞状态差）。

一般孔板有边缘效应，尤其是12孔板，感觉不能在孔板中摇散，需要混匀后，直接加入

细胞聚团的原因有以下几个可能：

细胞死亡释放出DNA，缠绕其他细胞，形成黏性的细胞团（消化的过程可能过于粗暴，吹打太用力，消化太久，消化液太强或有毒性等）。细胞离心速度过大或时间太长。消化不完全的时候，细胞和细胞之间的连接没有分开；消化过度的时候，圆形的细胞容易聚堆，再分开很困难！状态不好、老化的细胞，也可能会出现抱团生长的情况（比如换液不及时、长的太满才传代、污染等造成的细胞状态差）。传代时没有吹打均匀，细胞团多，培养时就会是一团一团的。传代后细胞铺板不均匀。有可能是杂细胞，或者死细胞。细胞未消化开。非震荡培养或细胞量过多的话就会成团。

细胞聚团大概率是因为传代时细胞没有吹打均匀，细胞成片消化下来铺到板上导致成团

主要原因可能还是细胞质量问题，本身代谢就慢或者脆弱；再一个可能跟培养过程中的维护有关系，细胞密度太低或者太高都会导致细胞凋亡，死亡的细胞裂解物包裹未凋亡的细胞形成絮状物，这些絮状物在显微镜下看的话就是细胞聚集。几乎任何细胞都有聚簇生长的倾向，这主要是由于细胞的生长繁殖及其功能发挥需要胞间连接、细胞旁分泌等的相互作用，聚簇生长有利于细胞的繁殖，且更有利于其功能的恢复及发挥。