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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
跑电泳条带时两侧上翘,和中间不在一个水平线上是什么原因?
sswei
形成原因:主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的,多出现于较厚的凝胶中。处理办法:待其充分凝固再做实验
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问
怎么绝对定量分析蛋白含量
土井挞克树
蛋白质绝对定量分析依赖于已知浓度的内标肽(命名为AQUA),内标肽通常由含同位素的氨基酸的组成,以便与天然肽区分开来,利用串联质谱法检测引入了已知浓度内标肽的细胞裂解液,通过内标肽与天然肽的质谱测定比率,可以将天然肽的相对定量数值转化为绝对含量数值,在多肽、蛋白质水平测定以及蛋白翻译后修饰研究中广泛应用。
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问
请问这个蛋白组测序送样本有什么要求嘛?
sswei
1、 样品纯度应达到95%以上(HPLC), 标明准确纯度, N-端必须是均一的高纯样品,并纯度越高,实验结果越理想.纯度可以用采用HPLC,SDS-PAGE或质谱或CE鉴定,建议用2种方法鉴定。2、 样品量不低于50Pmol ,若浓度为5pmol/μl, 体积不少于10μl, 大于10pmol/μl 越好,并标明准确浓度。例如:分子量20000的蛋白,50Pmol约为1微克.3、 标明样品缓冲液
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问
请问PC3细胞贴壁快吗?
sswei
PC3细胞一般贴壁细胞在24h内即可观察到细胞贴壁,从而判断细胞状态,悬浮细胞则复苏后即可观察细胞状态。对于冻存时间较长的细胞,可能需要传代1到2次后,细胞才会调整到正常状态,所以细胞复苏后如果状态不佳,不要灰心,仍要细心培养。
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问
早期自噬和晚期自噬怎么区别?如何界定?
此用户已注销
看是否处于什么阶段,早期是自噬,晚期是降解。
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问
细胞完全培养基配置
sswei
在无菌的细胞培养液中直接添加青霉素-链霉素溶液(100×双抗):按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入青霉素-链霉素溶液(100×双抗),混匀即可使用。
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问
有老师用过(Rac)-Sograzepide吗?
土井挞克树
这个试剂在不同的实验中浓度差异比较大,所以厂家才会建议你自己摸索,还是做预实验吧,做一个梯度浓度来摸索一下
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问
PCR条带,liver RNA 老是拖尾模糊 是什么原因
土井挞克树
一般是引物特异度差导致的拖尾,更换引物吧
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问
求助铁死亡抑制剂Erastin和RSL3?
于小鱼鱼1998
一般是从0.01的浓度开始,一直可以加到O.1ug/ml
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问
求助,为什么wb两边marker会有印记,洗了半个小时洗不下去
土井挞克树
这个是转印时间太长了导致的,减少转印时间就好了
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问
孟德尔随机化请教
土井挞克树
可以的,近五年的文献多数选用10x5
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问
科研技术
于小鱼鱼1998
可以上KEGG数据库进行查询,这个数据库是常用的通路上下游信号分子查询库
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问
如何验证miRna结合位点是在CDS区的?
土井挞克树
可以通过特异性cds序列进行结合位点验证
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问
实验细胞系咨询
土井挞克树
我们实验室一般都用hmo6,细胞稳定,效果也不错
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问
转染中的氮磷比是氮和磷的什么比,如何计算?
于小鱼鱼1998
氮磷比是指氨氮和总磷的质量比,其计算公式为:氮磷比=NH3-N/TP
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问
新合成化合物的荧光标记
于小鱼鱼1998
可以将抗原和荧光先孵育,连接为共同体之后再与化合物进行连接,从而建立化合物荧光标记
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问
细胞衰老
于小鱼鱼1998
可以的,通过促进程序性凋亡可以抑制dna损伤
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问
这是骨髓间充质干细胞吗?
神乎其神
这个细胞鉴定可以去大的细胞销售网站查看他们的产品图片看一下,另外后期做流式验证下,最好找那种可以调黑背景光圈的倒置显微镜看一看。
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问
共培养T细胞分泌干扰素和颗粒酶B的计算
土井挞克树
可以设置两组干扰素与颗粒酶的单组对照,然后用共同组与单组进行比值,之后对比结果来看哪一种影响大一些
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问
处理后总蛋白减少 可以说明信号通路被抑制吗
feixue7758527w
应该是被抑制了,处理后总蛋白变得少,说明信号通路是被抑制,导致蛋白表达变少的。这个说法还是有道理的。
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