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配好的SDS PAGE胶,分离胶和浓缩胶之间总是有气泡咋搞?
养点鱼吃火锅
分离胶做完后加无水乙醇找平,等凝固以后倒掉,把无水乙醇吸干了吗?或者是配胶的配比不对?
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问
各位大佬,帮帮忙,我这个wb条带怎么回事?
Eason老歌迷
一片狼藉啊!你显影前,先把板子擦一擦,是不是残留的显影液。然后你这个是不是上样量的问题,或者是你的洗膜时间太短。
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问
新配的WB一抗才用一次就有沉淀
汤姆卜丽波
是不是用的溶剂有问题,保证溶剂不污染
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问
求助:蛋白重组表达
bamboopiggy
先确定你蛋白表达载体确实构建成功,然后再重新挑个菌试试,可以加大一下菌液的量
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问
【求助】如何判断 Stripping Buffer 的洗脱效果?
Eason老歌迷
就我的经验来看,时间越久、次数越多、温度越高,洗脱的效果就越强。你可以通过以下方法来判断效果,先试试只洗一次,如果洗不掉,可以尝试升温和延长洗膜时间。你可以看哪个抗体条带染得最深最不好洗,你就用它开刀
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问
westrn blot新手,请各位帮忙看看目的条带上为啥有这么多黑点
Eason老歌迷
一般不会出现这么多黑点点,你这个是封闭液的牛奶没混匀吗,取的上清液吗?或者你是不是抗体没孵均匀啊!你放摇床上摇了吗?
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问
请问pcr序列是这样的下一步怎么办
汤姆卜丽波
再严谨操作加一次样测一次,还是这样就要换引物
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问
这个CNV与HCC的关系如何解读呀?
bamboopiggy
CNV指的是copy number variation,看你的这个文献是说,跟平均的CNV的一个差异值。
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问
怎么检测大鼠后循环缺血模型是否成功?
bamboopiggy
如果想看是否成功,最好的办法就是取脑组织,直接染色看,损伤,但是如果还想取得别的检测指标的话,一般就是进行行为学检测,可以跳台也可以水迷宫,主要看你们有什么器材
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问
大鼠肝功能检测(ALT、ALP、AST)可以用肝脏组织检测吗?
bamboopiggy
这个一般是用血清测得,用肝组织你可以染一下看看。
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问
大鼠肝功能检测
bamboopiggy
肝功能需要用血清测,血清可以保存在-80,一起测
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问
琼脂糖凝胶电泳
bamboopiggy
AF488是耦连的抗体和蛋白结合的,琼脂糖凝胶是直接DNA跟染料结合的
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问
求助其他肝癌细胞系
秋秋欣欣
有 LO2还有SMCC7721 huh7
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问
求助,成纤维细胞敲除常用的Cre酶有哪些。
秋秋欣欣
Cre重组酶,beta内酰胺酶
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问
蛋白测序与mRNA测序具体应用方面有啥差别?
汤姆卜丽波
这个要根据你的实验目的,比如在研究DNA甲基化或者转录水平的调控时,只检测mRNA表达就可以了,但要研究某个基因功能的时候,通常要用到的过表达敲低技术时,检测其蛋白的表达将会比检测mRNA更有说服力,因为只有该基因表达成蛋白了,才能行使其生物学功能,从而对下游基因或细胞产生影响。对于检测临床标本或者动物组织中的基因表达,如果同时检测mRNA和蛋白并得到一致的结果将会更有说服力。
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问
添加完支原体清除试剂后,若细胞恢复状态需要多长时间
bamboopiggy
一般需要1-2周,可以随时进行支原体检测来确定截止点
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问
细胞感染支原体的原因是什么?
bamboopiggy
因为人身上可能带支原体,在操作过程中很容易带到细胞中去,并且细胞间如果有支原体污染的,再不注意的话,气溶胶更会造成污染。
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问
想问一下以下条带不出还有孔间间隔黑乎乎的是什么原因啊,不止出现过一次了,怎么调整好?
Eason老歌迷
你这是不是孵二抗时间太长了啊!一个小时就够,你这感觉是孵太长时间二抗了,我之前也遇到过这情况。
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问
目的条带很细(前几次都是正常粗细的条带),怀疑是一抗失效(国产的一抗用了5次左右),重新配了一抗重新孵,还是很细,请问原因是什么
Eason老歌迷
你前几次和这一次上样的量差别大吗?然后你电泳的时间长短呢?你制作的胶浓度和之前有变化吗
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问
Balb/c小鼠脱肛怎么办?
府宅
手工复位直肠,荷包缝合肛门,留一小孔排便
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