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药物诱导细胞自噬,那蛋白该怎样提取,有什么特殊之处吗?
汤姆卜丽波
没啥特殊的,就按照提蛋白的试剂盒提就可以
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问
自噬双标转染诱导后如何统计结果?
汤姆卜丽波
直接上图就可以了,图注标清楚了就行
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问
Caco-2转运代数
bamboopiggy
Caco-2是人类结肠腺癌细胞系,已经是永生化的细胞系了。你没法详细的查到代数
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问
没有表达矩阵的数据要怎么做分析
bamboopiggy
如果找不到,就换一个吧,现在上传GEO的数据挺多的
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问
cck8实验,可以用24孔先培养,后面再刮下来到96孔做cck8吗?
bamboopiggy
你可以加完cck8以后,直接收上清到96孔板,去测od值。
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问
我又来提问了……突然想到……电泳结束一直没有处理,接近1个半小时以后才转膜,会导致条带不显影么?敷了3个抗体都没显影,内参没敷
汤姆卜丽波
很有可能啊,放久了条带都弥散了
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问
PEI转染293T细胞和293S细胞,转染效率差异大吗?有了解293S大规模转染条件的吗?
灵枢天问
293T 和293S转染效率差异不大,都属于相对好转染的细胞,转染条件就是看你用的转染试剂了,根据你的试剂说明书来
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问
分选出来的肿瘤干细胞表面标志物阳性要达到多少,才能进行下一步实验。我是双阳性选用CD133和CD44
秋秋欣欣
一般至少是要达到60-70左右
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问
星形孢菌素诱导293T细胞凋亡后检测
汤姆卜丽波
转膜时间不要太长,选择0.22um的膜用来转膜,需要注意蛋白是否转过等,可以通过marker预染,保证滤纸上不要有蛋白。如果你的是湿转的话,100v转的话时间可以低点,1h到1.5h看看。一抗4度过夜就行了不要孵育太久,不然背景会加深的。看看说明书的抗体推荐稀释度。
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问
星形孢菌素诱导293T细胞凋亡
秋秋欣欣
一般浓度为10-200nM,你可以做个梯度。时间1-3天都是可以的,看细胞代谢周期
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问
测序差异越大的指标是否说明其对疾病的贡献也越大
秋秋欣欣
测序的结果只是基于现有的数据,文献以及大家上传上去的数据,有片面性,还需要进一步的用实验去验证,当然差异越大我们认为他越可能有贡献,并不能说明贡献相应的也就大。
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问
难道这才是隐窝?
秋秋欣欣
你这看着不太像隐窝结构哦,隐窝结构有点像星状的
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问
高分化pc12
秋秋欣欣
是可以的,但是更常用的是pc12未分化细胞
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问
关于PBMC培养的问题求助
秋秋欣欣
可以先收集未贴壁的细胞,再消化收集贴壁细胞,细胞损耗大的话,注意控制好消化时间
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问
在进行乳腺细胞氨基酸的添加前,怎么保证细胞可获得维持生长及合成酪蛋白的氨基酸?
秋秋欣欣
0.5%加入,然后调ph,灭菌
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问
求助:怎么用酶联免疫吸附法测定细胞中的酪蛋白?
秋秋欣欣
有专用的酶联免疫吸附法测细胞酪蛋白的试剂盒,按照操作步骤做就行,做标曲,根据标曲计算可得
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问
求助:如何利用检测细胞中某些特异性蛋白的表达情况来鉴定细胞?
灵枢天问
你是想通过检测蛋白鉴定细胞么,那也可以直接鉴定细胞,同功酶分析、染色体组分型、人淋巴细胞抗原 (HLA) 分型和扩增片段长度多态性 (AFLP) 的特征分析、STR 分析都可以用来鉴定,STR 鉴定的试验流程:细胞 DNA 提取——多色荧光体系复合扩增——DNA 片段分离荧光信号检测——数据分析得到的基因分析和图谱——与数据库对比和结果分析——出具数据报告,一般交公司会快一点
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问
求助图片出自哪篇论文
秋秋欣欣
立美芙:银屑病新药获批入医院的宣传图
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问
sp2/0状态
灵枢天问
有点可能是自发转化了,培养环境再稳定一些,我看你的细胞状态挺好的,很快就会好了
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问
circBank数据库问题求助!
灵枢天问
如果你筛出来的circ不多的话也可以直接实验验证
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