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        细菌WB实验的注意事项

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        周末也要努力呀

        有人做过细菌成分的WB吗?内参如何选择呢?裂解蛋白跟细胞一样吗?一般都选哪个蛋白做内参啊?谢谢

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        5 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        我当时是做蛋白纯化裂的菌,可以直接用裂细胞的lysis裂就可以,但是内参,我没有做过,你要不做个蛋白定量试试

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        细菌跑和细胞是一样的,毕竟细菌也是细胞的一种啊,内参就看你的目的条带了,不重合就行

        user-title

        府宅

        有帮助

        细菌的内参常选用16S, 16s ribosome就可以

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        跟细胞差不多,加裂解液或者pbs然后超声,gapdh或者actin

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        目前我没有做过细菌成分的wb。但是内参的选择都是相通的,内参抗体分为未标记型和标记型,标记物包括生物素、HRP、FITC、PE、Cy染料和Alexa Fluor染料。内参抗体种类很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Vinculin、Lamin B、PCNA等。你做的细菌成分的,应该参照文献报导,选择合适的蛋白作为内参。

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