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p-smad2蛋白WB结果出问题求助
whilt-shirt
这种情况有可能是转膜没转好导致的
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问
要做细胞周期实验,老师说必须要有阳性对照组,但我查了很多文献都没有写阳性对照组
Eason老歌迷
需要的!这个高分sci都有阳性对照,一般阳性对照是用一种效果明确的手段来检测结果的有效性。
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问
PC-3前列腺癌细胞培养
Eason老歌迷
我觉得F12养的挺好的啊!推荐F12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%
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问
基因富集
whilt-shirt
一般至少都几十个吧,少了的话结果不太可靠
2 回答
521 围观
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问
这种克隆形成的板子能用吗?
balalaLy
水印的问题不大,但是你这个已经15天了克隆数太少了,而且还聚集在孔板边缘,你可能需要增加铺板细胞数重新做。
3 回答
607 围观
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问
SDS-PAGE蛋白定量问题?
whilt-shirt
没有用过赛智的软件,一般都是用image j软件分析灰度值
3 回答
781 围观
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问
蛋白质凝胶电泳的问题?
whilt-shirt
有可能是loding有问题,建议重新换个loding试试
3 回答
1004 围观
3 回答
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问
求助大家,我的细胞是污染了吗?
Eason老歌迷
是的啊,有点像。细胞污染一般你可以先拿显微镜看看,看看有没有游动和混浊。然后可能是细菌,支原体,真菌,黑胶虫污染。
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问
细胞实验酮类药物溶于0.1%DMSO中,需要设置对照组吗
Eason老歌迷
需要啊!你的药物溶于dmso,那么对照就是0.1%的dmso就行。
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2009 围观
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问
WB的样品变性后可以在4℃放吗?大概能放多久
bamboopiggy
我放过4度,overnight没问题,估计放一周问题不大
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12182 围观
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问
今天跑的wb又歪条带之间也没有分开,是什么原因呢
麻黄连翘赤小豆
歪可能是胶灌的不均匀,没分开可能是跑的时间太短,没跑开
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2451 围观
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问
蛋白泳道黑
麻黄连翘赤小豆
感觉像蛋白降解的问题,重新提蛋白再看看
4 回答
677 围观
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问
问一下关于自噬的问题
balalaLy
自噬在不同干预后不同时间点会有不同的表型,建议你做多几次重复实验,如果重复性好,就以自己的实验结果为准。
4 回答
369 围观
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问
细菌刺激细胞
Eason老歌迷
一般放回细胞培养箱培养,如果你做好消毒,操作得当,一般不会造成污染的。
2 回答
877 围观
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问
缬沙坦作用于细胞,用什么试剂溶解合适
Eason老歌迷
看你用什么实验了,如果是mtt,cck8就可以用dmso溶解。如果是加药,用血清培养基即可。你的浓度设定一般是按照你的实验目的来设计的,最好是先预实验,确定一个大概的范围。
2 回答
413 围观
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问
用红细胞裂解液裂解人外周血红细胞,离心后没有白色沉淀
Eason老歌迷
第一个问题:红细胞裂解液(Tris-NH4Cl)的配制比例和方法:称取3.735g氯化铵、三羟甲基氨基甲烷(Tris)1.3g加水溶解并稀释至500ml。0.22μm滤膜过滤除菌,4℃保存。细胞悬液加红细胞裂解液后,混匀静止4-5分钟,待红细胞完全破碎,1000r/min离心5分钟,弃上清去除红细胞,得到白细胞沉淀。第二个问题:我觉得你的离心力不够,或者是你提的细胞量太少了。
1 回答
2537 围观
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问
大家帮忙看看这个中间空泡是什么?
Eason老歌迷
如果不在细胞内在细胞外的话,可能是酵母菌等真菌污染。
2 回答
463 围观
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问
求助 siha细胞
Eason老歌迷
我也遇到过这种情况,应该是细胞污染了,你先养养看状态,在做处理。
3 回答
274 围观
3 回答
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问
WB实验内参经常性出现不齐,重新定量后也会有同样的情况,怎么解决?
麻黄连翘赤小豆
每次上样前可以试一下把蛋白摇一下,长时间冻融可能会导致管子里面蛋白不均匀
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1294 围观
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问
在第2向电泳中,为什么我的溴酚蓝条带都跑到玻璃板下缘了,而蛋白质只跑了一半啊?
Bnight
1、电泳缓冲液的问题:换用新鲜的电泳缓冲液2、分离胶内浓度不均:灌胶的时候胶要混匀3、分离胶凝固不均一:如玻板没洗净,玻板在灌胶前用吹风吹干时没冷却就灌胶
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673 围观
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