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问
细胞分泌型生长因子wb跑的分子量低于预期值
Eason老歌迷
如果是细胞蛋白的话,一般的可能性是抗体特异性的问题了。也有可能是你的maker有问题。可以用已报道的该蛋白有表达的细胞系做一个对照,最好是抗体说明书上用到的细胞系,这样就可以看看到底是你样品的问题,还是WB体系的问题。
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问
酵母蛋白诱导问题
Eason老歌迷
我们都是通过实验或者结合文献来探索出最佳区间。温度常温或者28℃。ph6.0—6.8等等。
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问
HIF-1a蛋白WB结果求助
Eason老歌迷
Hif-α的表达受细胞内氧浓度的高度调控,在低氧状态下表达会增多。HIF-1α在常氧下(21%O2)也有表达,只要O2>5%,即很快被细胞内氧依赖性泛素蛋白酶降解途径所降解!
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问
组蛋白ChIP-Seq后,如何设计ChIP-qPCR引物验证某个基因测序结果?
Eason老歌迷
上ucsc网站,可以在搜索框中输入基因名,然后点击go,会出现它的位置,以及对应的富集区域。我们可以看到有富集峰,则可以选择这段的序列设计引物了。如果是有peak信息且富集的程度非常强的话可以设计当成阳性对照,阴性对照找没有peak富集的地方。
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问
骨肉瘤原位模型造模求助
Eason老歌迷
每侧10的6次方,注射入裸鼠后股骨下段髓腔。
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问
高氧细胞造模求助!
Eason老歌迷
之前没有高氧仓时我们也是用过氧化氢来造模的,一般浓度不要太高,你可以是加药时间不对细胞就容易死。
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问
流式平均荧光强度
Eason老歌迷
负数是做Logicle转换之后出现的正常现象,要出现,也是出现在阴性群。锁以,不知道你比较阴性群的目的是什么?但用负数来比较一个结果,是不太好看。所以,如果你要比较一个标记的表达强度差异,无论如何,即使阴性,也总得让它出现在较强的区域,将电压调高一点即可。更不用说很多标记,都会比对照要强,只要电压不要过低,都不会存在你所说的问题。
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问
乙磺酸尼达尼布给c57小鼠灌胃,如何完全取出胶囊里面的药液?用什么溶剂溶解好呢?
Eason老歌迷
用注射器抽取即可,丢失量可以忽略不计,而且丢失的都一样。
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问
求助SD大鼠的M1区体表定位方法
Eason老歌迷
有一本大鼠大脑定位图谱,你可以看看我发给你。
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问
如何全面地了解一个基因?再向某个方向深入调查?
Eason老歌迷
先上ncbi网站搜这个基因,里面的东西很全,我觉得够你学。
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问
想做egfrvlll 胶质瘤免疫构建人源还是鼠源的?基因差异大吗
Eason老歌迷
我觉得你可以构建鼠源的,这个好构建些。基因差异不是特别大。
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问
双酶切鉴定实验有目的条带,但是底部也出现非特异性条带。
Eason老歌迷
可能是出现了非特异性酶切。是不是你的酶切时间过长,我试过最长切过8小时,有一些内切酶会出现这种情况了。是不是配的酶切体系当中,酶的体积超过了总体积的10%,过量的甘油会影响。
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问
Flowjo作图,如图所示,怎么把两个峰的高度调成差不多的。已经用了down sample插件,没有成功,求指导
Eason老歌迷
如果没有明显的双峰分布,或者你想把两个峰的高度调整成差不多的,可以在在设门界定阴性群和阳性群的时候:应使用区域门进行设门,阴性群和阳性群之间的距离要尽量远一些,阴性群不要包含极低值区域,阳性群不要包含极高值区域。
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问
如何对分光光度计的数据进行处理?还有一些实验上的细节性问题?有人能搭理一下我吗?
Eason老歌迷
测出标准的已知浓度值溶液对某一波长光的吸收率E,做出吸收率E与溶液浓度N的曲线.然后,对未知浓度溶液在同一波长光下,测出其吸收率,从曲线上就可以求出其浓度值,改变波长,可以重新做出对这一波长的吸收率E与溶液浓度N的曲线,再进行测量。
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问
LAMP扩增假阳性问题
Eason老歌迷
LAMP 扩增技术灵敏度高,一旦开盖就容易形成气溶胶污染,目前国内大多数实验室不能严格分区,假阳性问题比较严重。大量研究推荐使用浊度计等不开盖方法检测扩增产物。
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问
LPS造模剂量摸索
Eason老歌迷
下一步你可以在1-15之间进行筛选
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问
组织片TUNEL染色后凋亡率计算
Eason老歌迷
可以用iamgeJ来计算。也可以人工来算,首先是选取5个高倍视野,找500个细胞来数凋亡数,然后比值。
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问
滤膜选择问题
Eason老歌迷
混合后带有机溶剂的一律过有机膜!
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问
DNA合成中BrdU的掺入
Eason老歌迷
可以的,它也是属于原料的一种,
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773 围观
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问
RNA稳定放线菌素D实验,结果曲线在某一时间点忽然翘起的原因?
Eason老歌迷
放线菌素D抑制RNA合成,是不是在这个时间点实验条件抑制了它的作用
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