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问
氧化铁纳米颗粒虽然粒径很小,但很难过0.22um的滤膜,大家有什么解决方案吗?
Eason老歌迷
虽然可能是粒径很小,但是考虑有没有吸附的作用?
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问
磷酸化抗体的检测样本制备时是否一定要加NaF等?
bamboopiggy
NaF属于危险品,现在很难买了。一般这样的样品,你可以在lysis里面加点磷酸酶抑制剂。
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问
WB条带总是歪的,加样也很正,不知道什么原因
秋秋欣欣
那可能是你配胶没混匀的问题,没凝好吧
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问
想测pi3k表达量,分为好几个亚基,该怎么选一抗呢
whilt-shirt
根据你的下游蛋白是受哪个亚基影响来选择
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问
【求助】HEPES可以用PBS代替嘛?
东北的雪狼
联系不要用PBS代替,会影响实验结果。
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问
线粒体亚基蛋白怎么提取呀
Eason老歌迷
先破碎细胞保存线粒体活性,在分离线粒体,最后破碎线粒体,提取线粒体蛋白
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问
为什么WB曝光后,sample图里的marker变白色,背景变黑色?
Eason老歌迷
可能是你的膜在实验过程中变干了,可能是洗膜不充分,可能是检测时曝光时间太长了。
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问
求助Western blot的结果如何量化?
Eason老歌迷
可以用ImageJ软件进行Western Blot的量化,
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问
蛋白提取SDS-PAGE相关问题?
申东熙老伯
可能是蛋白浓度太低,浓缩一下试试。
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问
请问在显影过程中胶片变黑了是什么原因,是拿出来之后就曝光了还是其他原因,求解答
Eason老歌迷
是不是在显影液里泡的时间太长了,如果时间太久就容易黑黑一片。
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问
为什么上样25ul跑胶始终是弥散的没有达到浓缩的目的?
申东熙老伯
你的样品是怎么处理的,应该超声破碎之后煮样,加足量的loading就可以了。
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问
elisa测量 小鼠IL-22,试剂盒测量范围在31.5-2000,看文献一般波动就在这个范围之内,请问这种情况下还要稀释吗
Eason老歌迷
如果在范围内波动的话,就不用稀释。如果要是都低于最小值,就需要重新在做了。
4 回答
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问
WB实验曝光膜很脏是因为二抗加多了吗?产生了非特异结合?
Eason老歌迷
膜很脏 有可能是你的封闭时间不够,或者是抗体浓度太高。
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问
RIP实验为什么不能用CHIP实验代替呢?研究蛋白与重复序列的相互作用为什么用RIP不用CHIP呢?
Eason老歌迷
研究蛋白与重复序列的相互作用为什么用RIP不用CHIP呢?是因为chip交联的效率可能只有5%,甚至更低。你也许错过了相当一部分的结合位点。CHIP并不像RIP那样是定量的,它无法区分RNA结合蛋白与这个或那个RNA目标的相对亲和力。
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问
分子量小于1万道尔顿的,使用什么蛋白marker?电泳条件是什么?
bamboopiggy
你去一些卖marker的官网上找,保证有小于10KD的marker可以用,建议你用15%的胶跑就可以
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问
为什么跑出来的内参条带会连在一起??
sophomore
一是上样量,需要调整;二是内参的选择,根据实验需要再做优化;还有就是分离胶,积层胶的配制,根据实验方法调整下比例。如果还是跑的条带不满意,可以试用预制胶做,观察下实验结果。
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问
DNA检测时,蛋白消化效果怎么评估?
天一湖医者
对消化后的蛋白残留量进行评价WB比较好。
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问
CCK8
bamboopiggy
你做cck8的标曲作什么呢?判断细胞数?可以X轴细胞数,Y轴OD值,选择散点图,插入趋势线,然后选择公式,就可以得到y=ax+b,你知道了y的值,就可以得出x的值。
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问
流式细胞摄取实验数据大神指点怎么处理啊?跪求各位
Eason老歌迷
有没有使用补偿算法和归一算法对原始数据进行处理啊
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问
miRNA minics和质粒进行共转染?
Eason老歌迷
理论上共转染的时候minics和质粒可以分别用不同的转染试剂进行转染。但是我没有试过这种方法。
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