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问
wb出现2个条带怎么回事?
bamboopiggy
可能是抗体不特异,可能是胶的浓度出现问题,也可能是buffer的问题,或者有的蛋白就是两条带,如果LC3B
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问
在做ELISA实验中,最后要显色多久可以加终止液进行终止,显色的原理是什么呀?
bamboopiggy
看你用的kit的说明书,一般在kit给的范围就可以。
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问
关于WB灰度值量化为柱状图的疑惑
Eason老歌迷
这两个没啥区别,都可以用。灰度直方图实质就是一个大小为256的数组,数组的下标为0 ~ 255,分别代表了图像采样量化后从0 ~ 255的每个灰度级。计算灰度直方图,其实就是通过遍历图像的每个像素点,统计0 ~ 255的每个灰度级在图像中出现的次数,而统计后的总次数或者归一化后的频率就作为这个数组对应下标的元素取值。
4 回答
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问
Elias实验问题寻找?
dxy_082oaia6
如果不是偶然现象每次都这样的话考虑捕获抗体和二抗或者检测抗体可能存在交叉偶然现象可能是所用buffer污染
3 回答
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问
测RNA浓度结果为什么要乘以8
bamboopiggy
1.你用什么方法测的?2.测RNA浓度的目的是作什么?3,如果是做反转录,没有8这个说法,一般是nanodrop测得浓度值直接用得。
4 回答
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问
转膜marker没有全部转过去
balalaLy
用的多少浓度的胶,胶浓度太大也会导致大分子很难转过去
3 回答
2008 围观
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问
细胞污染
汤姆卜丽波
你看一下它是活动的么,有可能是杆菌
3 回答
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问
关于高GC模板(>65%)PCR扩增
Eason老歌迷
PCRx Enhancer Solution有助于扩增GC丰富序列,可以提高引物结合的特异性和Taq酶的热稳定性,并且便于镁离子浓度和退火温度的优化选择。我之前扩增一段GC比70%的序列,可能还有二级结构,用了多个厂家的DNA聚合酶均扩不出条带,改用Platinum Taq DNA聚合酶后,当PCRx Enhancer Solution添加到浓度为3×时得到了很漂亮的结果。
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问
细胞因子干粉重构后的保存时间
Eason老歌迷
一般4℃可稳定储存4-7天,要是存放于-20℃,可稳定保存至少三个月。
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1249 围观
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问
求助如何提高蛋白质的溶解度
还在陆上surg
水温37度,加点盐,减弱分子间作用力。
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问
DTT毒性强吗?为什么我闻了会恶心,我同学不会啊
汤姆卜丽波
总之是有毒的,而且它确实味道很不好,带好口罩做好防护
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问
求助:请问细胞实验中,取不同时间点进行细胞增殖的测定,其中时间点0h是什么意思?
汤姆卜丽波
对。就是药物刚加进去就测,相当于空白对照之外的一个对照,为了做曲线用的
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问
CCK8实验
汤姆卜丽波
如果确实经费紧缺,比如我们。。。那也可以
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问
从细胞中提取内源性表达的蛋白,按照常规方法做,可是最后银染总是没有条带? 多谢多谢!
天雨心晴
首先要确认的是你的目的蛋白是否有被IP下来。最好用western检测一下IP沉淀中是否含有你要的内源性表达的蛋白,有的话再进一步做银染。银染的上样量可以大一些。当然我觉得可能你在IP的过程中出现问题的几率比较大。
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问
提蛋白加RIPA后泡沫很多?
汤姆卜丽波
吹打的时候注意不打完这样泡沫就会少很多
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问
NC 膜 PVDF 膜 尼龙膜的差异。
天一湖医者
NC膜只可以和单链rna.dna在高盐条件下结合,与dna分子非共价键结合,易丢失dna.而且NC膜很脆,易断,不能反复使用,优点是对探针和蛋白质吸附作用较弱,杂交信号本底低。尼龙膜可以与单链及双键多核苷酸链结合,与DNA共价键结合,可以反复利用10到20次,膜强度高,不易破坏,优点是可以重复使用,碱可以促进DNA与尼龙膜的结合。
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问
PC12
汤姆卜丽波
这个你好好调一下倍镜,我感觉像是没调对,也可能是细胞残骸
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问
求脑内皮细胞bend3的培养经验
汤姆卜丽波
你查一下它的血清要求。有的细胞要用高糖,有的用1640有得用Mem都不一样
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问
求助求助
balalaLy
我们课题组之前做衰老课题也是体内体外结果不一致,逻辑上说得通就行
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问
定量PCR的时候怎么确定cDNA的稀释倍数?
秋秋欣欣
可以做一个梯度稀释,然后qPCR跑一下看
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