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关于RIP求助
Eason老歌迷
是不是你的实验步骤有问题。细胞核分离和裂解物沉淀为避免污染,使用不含 RNA 酶的试剂。染色质剪切应该在液氮中冷冻一份裂解物用于对照 RNA 分离。根据所关注的蛋白质和抗体,加入的抗体量和孵育时间可能需要进行优化处理。
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问
凝胶电泳结果如图所示该怎么办
Eason老歌迷
你这是有点亮带拖尾。可能是你的引物设计不佳,也可能是PCR中DNA浓度加的太多,也可能是mg2+浓度加的太高。
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问
求助:请问细胞在无血清高糖培养基环境中合成酪蛋白的时间大约能维持多久?
Eason老歌迷
细胞在无血清高糖培养基环境中合成酪蛋白的时间大约能维持在24h左右。当无血清高糖培养基中无法使细胞合成酪蛋白时,重新换新的无血清高糖培养基能够使细胞重新开始合成酪蛋白。
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问
请各位老师帮看下这家伙算不算是自噬体谢谢!
Eason老歌迷
是的,应该是自噬体。自噬体是单层膜,内膜部分被水解,部分内膜与外膜融合。
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问
成骨细胞不贴壁是死了吗
Eason老歌迷
到不一定肯定死了,但是状态肯定是不好的。
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问
头孢曲松钠小鼠注射用法用量
Eason老歌迷
我记得实验手册上有,100mg/kg剂量注射鼠尾
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问
求助|活化的b细胞形态正常吗?
Eason老歌迷
感觉还行,还是有一些活化的细胞存在,但是形态不是太好。
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问
请问大家PC12细胞造抑郁模型,有成功的吗 分享一下经历,我做了一年了,都没成
whilt-shirt
可以参考这篇文献:谷氨酸和皮质酮诱导的PC12抑郁症细胞模型差异性的1H NMR代谢组学研究
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问
蛋白质拓扑结构示意图绘制
bamboopiggy
这个可以用AI,自己画,如果你已经知道你的蛋白的结构的话
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问
生长曲线 细胞
bamboopiggy
这个看你测细胞浓度用的是什么方法,如果是cck8/mtt的话,如果你的酶标仪在无菌环境中的话,你可以用一块板。如果是在普通环境,你就需要一块板,一个时间点
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问
慢病毒转染细胞死亡
Eason老歌迷
一个是调整细胞状态,感染时使用对数期的细胞:增加细胞膜的流动性。二个是降低感染时血清浓度,使用无血清/低血清的培养基:降低血清蛋白对病毒外壳蛋白的封闭。三,你是不是使用了Polybrene,Polybrene本身就具有细胞毒性,部分细胞对Polybrene敏感,容易导致细胞状态变差、形态发生变化、甚至死亡。
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问
停跳液配方
whilt-shirt
可以参考一下这个,应该差不了太多
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问
小鼠离体心脏灌流
bamboopiggy
你的实验目的是什么呢?根据你的实验目的来决定什么时间加CaCl2
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问
cck8测增值,实验组和对照组细胞数总是不一样,该怎么处理,,结果怎么分析
bamboopiggy
实验组和对照组的0天,可以作为1,然后后面的每天和0天比。当然如果初始铺细胞差太多,这个结果就不可信了。初始铺细胞,测细胞浓度的时候,建议弄到一个数量级,起始的细胞数就不会差太多。
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问
平板上取菌到液体培养基上的问题
bamboopiggy
你摇菌的目的是什么?如果是为了取到足够的菌,你可以做预实验试试,看5ml够不够,如果不够可以扩大到10ml啊
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问
求细胞生长曲线
whilt-shirt
之前养过一段时间,还是比较好养的,平均3-4天传一次代
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问
胶回收浓度低,但看着胶图很亮,提出来浓度在1-7ng/ul
balalaLy
溶胶的时候可以涡旋一下,促进溶解,最后一步加buffer溶解核酸时可以把buffer 50度预热一下,提高溶解度
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问
求助!做EMSA,蛋白与DNA不结合?
天一湖医者
可能是实验过程中破坏了蛋白和核酸之间的互相作用。
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问
高尔基染色
Eason老歌迷
高尔基染色的话,动物不能灌注,因为灌注会造成阴性结果。我们都是直接处死动物以后取脑组织,水洗一下,放入1、2混合液,24小时后换液,注意避光,室温放置14天。我觉得你说的这个沉淀其实对实验结果并没有太大影响。
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问
肺炎克雷伯氏菌感受态细胞总是电转不成功,请问OD值是需要摇至0.5还是要更高,因为0.2
府宅
制备感受态细胞主要是控制细胞在对数生长期就可以了,一般来说OD值在0.4到0.5,长到OD值0.4~0.5的细胞摄取DNA的能力比较强,不需要更高。
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