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chip实验问题
Eason老歌迷
看了他的图,觉得是基因组DNA降解了或者根本没有提取出来。因为都没有看到DNA样品,亮带大小都在1200bp一下显然不是基因组DNA。
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问
FC载体构建
Eason老歌迷
是的,每次做抗原还要进行酶切去除,那也太麻烦了。换成羊驼的FC可以省去酶切这一步试一试,看看效果。
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问
求问Coip后质谱分析结果中蛋白评分多少比较可信啊?
Eason老歌迷
如果验证三次都没有验证出来,可能是假阳性,这种结果不太可信,过不了审核。
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问
求助|red同源重组,打靶片段连接不上
Eason老歌迷
可能有几个原因,red同源重组失败一般是因为DNA链断裂,还有可能是是同源臂太短(<13 bp)没有连接活性,连接不稳定,会断开。或者是同源臂不在载体末端,重组酶切不到可以连接的序列位置,连不了
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问
小鼠空肠Il-1β的表达情况
Eason老歌迷
可能有几个原因,一个是你的上样量的问题,二个是你的上样顺序有没有错误,三个是你的模型是否成功,四个是你的实验次数,可以做三个重复看看情况。
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问
求助大佬,小鼠的流氏细胞术检测
Eason老歌迷
不可以用脾脏代替血液来做流氏!还有就是小鼠做淋巴细胞分群必须经过刺激培养,最好是按照操作说明书来,不用图省事。
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问
紧急求助各位大佬!!
whilt-shirt
这种情况可以自己分离原代细胞试试
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问
求助:小鼠皮肤表皮真皮分离
Eason老歌迷
可以浸泡过夜后,用手术刀刮除表皮。刮下的表皮可用于分离表皮细胞,每只小鼠可得到约3x10个表皮细胞。然后将真皮剪碎,0.25%的胶原酶37℃消化至少1h,在处理真皮细胞。
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问
MA104细胞感染病毒
Eason老歌迷
具体可以参看这个文献,”轮状病毒感染诱导MA104细胞感染相关蛋白的分析鉴定”。感觉是你细胞生长状态不好,都老化死亡了。
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大鼠心电问题
Eason老歌迷
可能会影响对结果判定的准确性,大鼠标准肢体导联比较杂乱,对心肌缺血的判定也很不是很敏感。可以用胸导联试一试,你可以找3只5.1K或5.6K的精密电阻(误差<0.5%)。将3只电阻的一端绞在一起,接生物放大器输入“-”极。生物放大器输入“+”极,接胸导联的某个部位,如V3或V4。生物放大器输入“地”极,接动物右下肢。这样就可得到比上述ECG漂亮的胸导联ECG图
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问
关于抑郁大鼠模型
whilt-shirt
可以试试换其他公司的老鼠看看。
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问
大鼠怀孕
Eason老歌迷
一般我们都是用棉签蘸取法,然后涂片,染色,观察。
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问
如何获得抗体的可变区序列?
Eason老歌迷
具体可以参看这篇文献,”一种结合SOLID测序和单细胞RT-PCR的人抗体可变区获取方法”。还有这篇也详细讲解了过程”抗RET突变体蛋白单克隆抗体可变区序列的制备方法与流程”。
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669 围观
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问
关于CD11b和Iba1标记活化的小胶质细胞
Eason老歌迷
cd11b和iba1组合标记可用于区分小胶质细胞与巨噬细胞。静息小胶质细胞表面标记物为 CD11b。
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4375 围观
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问
内质网荧光染色证明内质网应激
Eason老歌迷
具体可以参看这篇文献,讲的很清楚,”内质网特异染色法在内质网应激评价中的作用”
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1175 围观
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问
求线粒体自噬特异性抑制剂
Eason老歌迷
我们一般用3MA比较多,推荐你用这个。现在有文献已证明ULK复合物和Beclin1的正调节剂的抑制剂可阻断线粒体自噬,包括MAP激酶,JNK1,ERK和p38的抑制剂。阻断线粒体自噬也有其他方式,如class III PI3激酶抑制剂可通过抑制自噬捕获阻断自噬进程,所以说这些也可以用。
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1752 围观
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问
如果提取蛋白的浓度较低,有没有什么办法可以浓缩下?
whilt-shirt
可以使用透析法浓缩蛋白,也可以增加上样量
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1176 围观
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问
遇到一个病例,APTT一直100多,用当天凝血正常的血浆10人做正常混合血浆
Eason老歌迷
建议你参看一下这篇文章,鼓楼医院写的,”《出血与止血系列讲座》第三讲:凝血实验中的APTT纠正实验”。我之前也遇到过一个这样的情况。
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507 围观
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问
求助各位大佬,纯蛋白过离子交换柱前平衡柱子时为什么要用高低盐平衡?为什么要降盐啊?
Eason老歌迷
有利于纯化啊。不同的离子团跟柱胶的结合能力不同,盐梯度洗脱可以使结合能力不同的离子团逐步洗脱,常用于不同蛋白的分离纯化。
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问
ROS检测
whilt-shirt
有可能是高浓度导致细胞全死了导致的
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