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问
细胞间培养液有渣且细胞形态不饱满,是黑胶虫吗还是胰酶消化的问题(消化时难消化)。
申东熙老伯
细胞形态不饱满有可能是消化的问题,难消化的话可以试着再摸索一下消化条件,37℃培养箱消化,时间适当加长,消化结束可以轻轻拍一下培养皿,看一下细胞有没有脱落,然后再终止消化,多吹打几次把细胞完全分离开。
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问
背景有黑色斑点或有不均匀的白色斑点以及暗背景上白色带,是什么原因导致的?
bamboopiggy
1.背景黑斑一般是抗体不特异。2,不均匀的白色斑点可能是封抗体的时候,气泡没有赶好,3,暗背景白色条带,可能是蛋白量太高,烧心了。
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问
求蛋白纯化和测序方面的书籍名字作者
大草原的小灰驴
Terry SpeedMichael S. WatermanKeith R. Mitchelson R R 伯吉斯马文丽 宋艳斌
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问
求助 MALDI-TOF检测BSA衍生物总是测不到信号
Eason老歌迷
我做过这个反应,不同物质的化学位移不同。我的化合物中NHS中两组氢的化学位移是4.02氘代氯仿做溶剂。我做的这个反应都是搅拌过夜的,反应要求无水,我用的是重蒸试剂,你换个重蒸试剂看看,再安全点可以无水无氧。确定试剂和溶剂都没问题就没问题了。
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问
请问有没有什么好方法能让磁珠在裂解液里面待的更久
bamboopiggy
可是试着调整裂解液和缓冲体系的PH,来确保磁珠的稳定性。
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问
rna m5c甲基化
Eason老歌迷
有。BSP是甲基化检测的金标准,这里就不细说了。主要说说MSP—甲基化特异性PCR。MSP的实验过程简单来说就是提取样本中的DNA进行亚硫酸盐转换,将转换的DNA进行定量PCR,由此来确定特异基因甲基化修饰,这样就可以实现你需要的某个特定基因甲基化检测。
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问
一换培养基就污染?
bamboopiggy
是国产血清的质量问题,你换用gibco的血清吧,有些细胞很挑血清的。
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问
分离胶贱到眼睛会不会有影响吗?
bamboopiggy
大量清水冲洗,如果眼睛没有别的不适感,也就这样了,不行就去医院。建议以后做这种实验,带护目镜吧
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问
各位前辈看看,这是属于细胞凋亡还是细胞焦亡。
bamboopiggy
你跑一下凋亡和焦亡的marker看一下吧,从形态很难判断。
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问
PFGE结果图
bamboopiggy
脉冲场凝胶电泳跑的是大分子量的DNA,出现黑色的位置,说明没有DNA存在在那个位置,DNA条带的位置比较往下。
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问
多黏菌素B药物浓度配制
Eason老歌迷
50万单位,1mg=10000单位,你可以算出它的质量,通过质量和体积,可以得出浓度,然后就是稀释即可。
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问
[求助]用ELISA测血浆中TfR1(转铁蛋白受体1)
冷泉港蛋白
1.如果是临床试剂盒,试剂盒说明书会显示。厂家在开发试剂盒的时候,抗凝、促凝及不同类型抗凝剂,厂家必须做相关实验,只需提前阅读说明书就行了。2.如果是科研类试剂盒,有些厂家也会做相关类似验证实验,可能不会做那么多类型。3.如果试剂盒说明书没有显示。你在UNiProt数据库查下蛋白的结构信息,看下目标蛋白是否含有金属离子,如果有的话,最好不要使用含有抗凝剂的管子,螯合金属离子后,会影响蛋白结构。
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问
求助 | Ficoll密度梯度离心法分离PBMC 在离心管底出现细胞膜 吹不开
大草原的小灰驴
把血液加入淋巴细胞分离液一步非常关键,必须要保持液面的平衡,要将离心管口45度倾斜,然后以非常慢的速度,一滴一滴的靠着离心管内壁加进去,慢慢的加入几滴形成一个界面,全过程需要很稳定的手法。1、初始PBMC估计1毫升可以分出来100万个细胞。常规5 ml外周血可以分到5*10^6-1*10^7 cell,按照自己所需确定外周血体积。2、分离液与稀释后的血液比为1:2。外周血获得后进行密度梯度离心,最
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求助!请问WB我的条带为什么PLC5显不出Vimentin,Huh7显不出E钙呢?
bamboopiggy
1.首先确定你的细胞确实是plc/prf/5 和Huh7。2.去找你的师兄师姐要他们的细胞试试。3.Vimentin 和E-cadherin在不同的细胞,可能位置稍微你差异,你把膜切的大一些试试
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原代海马神经元-树突标志物MAP2染色
olaf闰闰
好漂亮,这是共聚焦显微镜拍的吗?
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如何用荧光显微镜观察悬浮细胞内离子
Eason老歌迷
染料孵育后离心取细胞沉淀,直接涂在玻片上测。细胞内离子可以用多种仪器,如荧光显微镜、流失、激光共聚焦等。离子染料比较关键,一般有Fluo-2,Fluo-3,Fluo-4等,我用过Fluo-4,感觉还可以,可以用荧光显微镜检测。
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求助🆘bax免疫荧光1:50还看不到绿色荧光为什么呢?做bax的WB也是1:50信号也弱?谢谢
litorch
谢谢高手指点!下次我试一下红光,其他老师能做出来,我和他们条件一样,做出来效果就不好
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求小鼠肥胖程度分级标准
whilt-shirt
可以用lees指数将小鼠肥胖分为轻中重
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萌新求教流式细胞术检测CD4,CD8计数
Eason老歌迷
你这几个问题,我做一个统一回复。需要肝素抗凝静脉血1ml,不同荧光素标记的抗CD3、CD4、CD8单克隆抗体,同型阴性对照荧光物,溶血剂,固定剂,流式细胞仪。具体操作1、100μ1抗凝血加20μl荧光单克隆抗体,同时做阴性对照。2、避光室温作用20min,溶去红细胞后,固定剂固定。3、上流式细胞仪测定,以阴性对照测出本底参数,调节荧光补偿,设定阳性参数值,软件将计算出阳性表达细胞比例。需要注意1、
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问
核酸阳性质控VIC通道基因不起,内参和FAM通道基因表达的原因
哈哈好久
最好重新做一次,找能确定起的阳性再来一次,不然光一次无法确定是你操作还是什么原因
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