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WB曝光显示too faint到底是怎么回事?
Eason老歌迷
too faint!意思是你的条带太淡了,设备显示不出来。你转完膜用丽春红染一下,看看有没有条带。
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问
跑的WB为什么目的蛋白时高时低或者没有趋势呢?挺让人头疼的结果
Eason老歌迷
可能和你上样量不稳定有关,你提完蛋白测一下浓度,按照浓度算上样体积。或者是你转膜没转好。
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问
dapi用后背景高
Eason老歌迷
如果DAPI背景太高,可能有几个原因。一个是组织切片太厚。二个是封闭不佳,如果背景太强,可以考虑换种封闭液或者增加封闭孵育的时间。三是二抗有非特异性结合。四是抗体浓度太高,降低所使用的抗体浓度或调整孵育时间。五是洗涤不充分,染色有很多步骤,其中又包括很多洗涤的步骤。在实验过程中,确保洗涤到位。
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问
流式检测
Eason老歌迷
第一个问题,小鼠在进行4%多聚甲醛心脏灌注后,会对脑肿瘤中浸润的免疫细胞的流式结果有影响。第二个问题,脑中的小胶质细胞用percoll分离液或者淋巴细胞分离液分离出来,具体可以看下图。
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问
关于结直肠癌细胞株的疑问
Eason老歌迷
不一样!结肠癌细胞株和直肠癌细胞株不是一样的。如果要从细胞水平研究直肠癌放疗敏感性的问题,只能用直肠癌的细胞株!,不能用结肠癌细胞株!
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问
请问最后胶片显影的时间多长合适,怎么判断呢,老是掌握不来时间,感觉胶片放在显影液里面一分钟后会颜色会变深,但是条带还没有出来😔
balalaLy
时间不好把握的时候可以同时叠加多张胶片,总能得到一张比较合适的片子
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问
小鼠空肠Il-1β的表达情况
Eason老歌迷
可能有几个原因,一个是你的上样量的问题,二个是你的上样顺序有没有错误,三个是你的模型是否成功,四个是你的实验次数,可以做三个重复看看情况。
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求答:酶标仪为什么一直测了好多次都是负值?
whilt-shirt
有可能是酶标仪参数没设好导致的
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问
紧急求助各位大佬!!
whilt-shirt
这种情况可以自己分离原代细胞试试
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Tunel染色染到了膜上
whilt-shirt
有可能是染色时间不够或者染色剂质量不行导致的
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问
求助大佬:DSS诱导的结肠炎C57BL/6J小鼠,想要用流氏细胞术检测其Th1/Th2/Th17/Treg
Eason老歌迷
不可以用脾脏代替血液来做流氏。小鼠做淋巴细胞分群必须经过刺激培养。 2022-07-25
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问
关于抑郁大鼠模型
whilt-shirt
可以试试换其他公司的老鼠看看。
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问
TUNEL荧光染色
balalaLy
尽量不要长时间高强度曝光,会导致荧光萃灭。
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问
干细胞原代培养能不能用南美的血清
bamboopiggy
你可以先买一瓶试试,如果好,就直接把这一批买了吧,干细胞对血清比较挑,南美血清和澳洲血清一般也就是在有效的蛋白成分和抗生素含量上有区别,但是还不至于澳洲用5%,南美 用10%的这种差别,该用多少就用多少就好。
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问
如果提取蛋白的浓度较低,有没有什么办法可以浓缩下?
whilt-shirt
可以使用透析法浓缩蛋白,也可以增加上样量
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j774A.1细胞ASC染色
实验小助理静静
已通过审核~谢谢您的经验分享~快把本页面分享给好友为你围观吧~
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microRNA过表达后与靶蛋白表达升高?
bamboopiggy
一般加入microRNA 的mimics以后,蛋白是会降低的。你先确保你wb的实验没问题,内参齐。然后另外找个公司再合成一个mimics试试,可能是mimics的合成有问题
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氨基酸氧化
慕容过
可以试试分子互作试验。找相关生物公司。多种原理可以尝试
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抗体纯化求助
红格子一号
你首先要确定纯化之后是不是有蛋白质,看丽春红或者sds page,没有条带也有可能是纯化出问题了呀
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MCAO小鼠模型求助
sunny陈520
这个的确不好做,而且死亡率也高,不过多练习也可以的,以前做的时候用的是那种鱼线,很细,插进去的那端平口剪成斜口会好进去点哦
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