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tunnel凋亡试剂盒的使用
balalaLy
tunnel跟你要染的一抗二抗是两个实验,一般做tunnel都会单独做,因为不好染,假阳性多,你再加染个一抗,步骤有多了,相互影响。及时一起染,也是先染一抗二抗,后面再染tunnel
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抗原修复后DAB无显色
申东熙老伯
背景都没有片子都白了就是脱片。抗原修复结束一定要冷却。
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问
流失检测中多marker时荧光抗体的选择及补偿调节,真的要被补偿整懵了,看了很多原理都懂,但是实际操作还是磕磕绊绊
Eason老歌迷
没事,慢慢来,我之前刚做的时候也不太懂,对于荧光补偿的确定,需运用以上补偿的基本原理并结合特定的标本来实现。以FITC,PE双色分析为例:(1)先调节阴性对照管:将原补偿清零,首先调节电压,通过调节电压,使阴性群落在FITC和PE双阴性区。(2)FITC单染管:在理想情况下(没有荧光干扰),因检测管中不应该出现PE信号,但实际情况是在FITC与PE的双阳性区出现了荧光信号。这个信号就是PE探测器检
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问
MyD88抑制剂TJ-M201
Eason老歌迷
如果你刚开始做,我建议你做几次预实验,探索一下这个试剂的用量,做一个cck8看看最适浓度,然后你如果想偷懒,我可以给你分享一篇最近刚看的文献“新型MyD88抑制剂及其在脓毒血症中的应用”,一篇老文章。
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问
mirna慢病毒注射动物实验要注射几次?
Eason老歌迷
纯化过腺病毒:1-5×109毒量注射(1),比如纯化腺病毒滴度为1×1011PFU,则每只小鼠注射体积约为10-50ul。浓缩慢病毒:1-5×107毒量注射,如慢病毒滴度为1×10 8PFU/ml,则小鼠理论上注射100-500ul,实际上每次注射体积有严格要求(见下方),所以如果量不够,需要分多次注射,每次注射至少间隔1-2天。每只小鼠病毒注射体积:注射体积不要超过200ul,最好控制在100u
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问
Invitrogen Mitotracker DeepRed染色求助
balalaLy
我们也是用的invitrogen的mitotracker 染的,按照说明书染的效果,用的奥林巴斯显微镜100倍镜
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问
两性霉素B用DMSO具体怎么溶解?
balalaLy
细胞实验DMSO用量保持在千分之一以下浓度。
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细胞反复复苏反复污染,有没有解决办法呀,头疼,也不知道是什么污染,传2-3代,细胞
陈皮712
先检查培养箱、培养基、耗材(培养瓶等)是否有污染,细胞实验操作是否规范。反复冻存复苏恐怕不能解决污染问题,并且还会给细胞带来巨大的伤害。如果是贴壁细胞,可尝试以下方法:先将细胞消化下来,加入20%双抗完全培养基(10ml培养基+2ml双抗)终止消化并重悬,浸泡10分钟,1000rpm离心5分钟,弃上清。再加入20%双抗PBS清洗(10mlPBS+2ml双抗),1000rpm离心5分钟,重复2次。随
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问
CD3,CD28刺激PBMC中T细胞的激活
Eason老歌迷
之前看过一篇文献,分享给你,”CD3McAb,CD28McAb,CpG ODN刺激PBMC活化的研究”,讲的很清楚。
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问
WB中110KDa的蛋白怎么跑?
Eason老歌迷
配胶可以选浓度小一点的,因为你是跑大蛋白。先用50v跑,出浓缩胶后,换成120v跑。跑完转膜可以拿湿转,110属于大分子,转的时间稍微长点。效果会很好。
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问
求助:原代细胞提取,酶消化完离心无沉淀
Eason老歌迷
应该是有一个小圆白点。可能是你选取的组织提取的细胞太少了,也可能是酶消化时间太长了。
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问
求助|肺癌原代细胞培养求助!!
Eason老歌迷
你这个形态不行啊,师兄之前做过原代细胞培养不是你这样的,建议你重新取一次,或者看看能不能把细胞养起来。
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问
求助|Lmh细胞状态问题 培养基两天变黄但不浑浊 同样培养基传代的DF-1没问题
Eason老歌迷
可能是有污染。还有就是可能是你的细胞浓度太高,也可能是引起细胞培养基很快变黄。
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问
CCK8对照组细胞存活率
Topmicro
做的平行对照吧,多次重复实验总会有误差
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急性毒性实验备用大鼠的目的是什么?
Eason老歌迷
先备用,以防万一,因为它们是一个批次处理的,具有实验对比性,如果大鼠不够再去另行准备就不是同一批条件不一样,出来的实验结果没有说服性。
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问
【求助】小鼠肝脏切片免疫组化染色见大量胞内异常空泡,是细胞核着色不均吗?
Eason老歌迷
可能是细胞水肿,肝脏细胞是比较规则的,你这个不规则了。一般出现圆形空洞,是脂滴浸入有机溶剂溶解后留下的空泡,你这个图我不确定。另外,你的苏木素和伊红都没染出来效果,核应该是蓝色的,然后仔细看有的肝细胞是多核的,细胞浆是粉红色的。
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问
耐药基因分型分析
Eason老歌迷
可以用NCBI的blast去分析。你的匹配度不到100,可能是由于自身扩增时问题导致测序结果出现异常。
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问
各位老师来指点一下
Eason老歌迷
如果共定位也不正常,那就说明染错了,没事我之前也遇到过这种情况,这个就需要你一点点排查了,是不是你选的细胞就不太合适呢?
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问
这是血液中什么细胞?
陈皮712
这是直接离心后得到的血细胞还是经过淋巴细胞分离液处理的血细胞?图片不是很清晰,看起来像巨噬细胞,尤其像打过升白针后的患者的外周血的单核/巨噬细胞。肉眼看只能大概,如果要明确细胞类型,需要做流式分析。
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问
化学合成的siRNA转染细胞时阴性对照的作用是什么,怎么设计的阴性对照
Eason老歌迷
可以设计一个空转细胞当阴性对照。
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