实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问磷酸化AKT WB实验复孔结果差异大

bamboopiggy

wb只要趋势一致就可以，不能要求量一定一样，因为跑胶，转膜，封抗体等，都会造成影响。

4 回答691 围观

问MRC-5细胞生长巨快，1:4传，一只需要一天，正常吗，如果需要降低传代速度，那么1:8或者更高的传代代数，细胞会不会迅速老化？

Eason老歌迷

长的快说明细胞状态好。我觉得你可以用1：6/1：8这种传代代数来试试可以隔一天传一次。

3 回答1349 围观

问血清离心上层分层，但是吸取的会带有红色的血

bamboopiggy

3000rpm 5min就够了，或者1000rpm 10min，你说的上层有血，应该是红细胞破了。看你要做什么实验了，有的红细胞破了没影响，有的不行。

3 回答1852 围观

问脓毒症造模成功标准？

你好几和户

一感染因素最好以感染灶、创面感染或内源性感染的形式出现．以模拟人类感染引起---系列病理生理反应的自然过程；二发病过程中血细菌培养及内毒素检测为阳性；三MODS发生距原发打击有一定的时间；四有明显的脓毒症表现，呈现高动力循环状态和持续高代谢反应；五有足够的死亡率和MODS发病率。

3 回答2039 围观

问石蜡切片的制备过程中昆虫组织切不下来？

你好几和户

自己感觉可以检查下切片机的零件是否旋紧，切片是用力要适当，不可过猛，而且现在是夏季，石蜡容易软化，可用冰块冷却。

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问求助:免疫荧光实验出现结晶的物质？

bamboopiggy

检查一下你的盖玻片有没有特别脏，还有就是你拿什么封的片？

3 回答426 围观

问做wb，pcr 实验，解剖后新鲜组织可以先放-20度再转移到-80度吗？

bamboopiggy

最好直接放-80，速冻，否则组织容易降解。

3 回答823 围观

问请问跑wb,pcr 需要多少组织量呢？

bamboopiggy

wb你最好测个蛋白浓度，20-40ug的上样量就可以，pcr，只要够提dna的就可以，大概绿豆到黄豆大小吧

3 回答2088 围观

问变性蛋白和非变性蛋白，哪个保存的更久

bamboopiggy

最好是变性，非变性的更容易降解。

4 回答1038 围观

问elisa实验可以用超纯水可替代双蒸水吗？

bamboopiggy

你说的超纯水是miliQ水么？是可以的。只要不含杂质和盐就可以。

3 回答591 围观

问10%的预制胶，这条带是不是典型的哑铃型?求解决?后面反白跟封闭有关系吗?

bamboopiggy

用预制胶，要把梳子齿里的甘油冲干净，否则会影响上样的样子。反白，可能是你抗体浓度太大，或蛋白浓度太高，导致辣根过氧化酶反应太强，出现的烧心现象。

3 回答367 围观

问请教这四张图中分别都是些什么东西？第一张应该是污染了。后面的呢，谢谢

Eason老歌迷

后面三张分别是真菌污染，支原体污染，黑胶虫污染，

3 回答190 围观

问组合免疫检查点疗法可以通过增强代谢适应性来改善抗肿瘤效果吗

junyong151

通过靶向特定免疫抑制代谢物和细胞因子，可能会逆转T细胞功能抑制，增加T细胞抗肿瘤活性，最终提高免疫检查点抑制剂的疗效。

5 回答371 围观

问为什么石蜡切片总是会有裂缝

转云511

可能是脱水步骤时间太长了，也可能是切片的时候刀口有裂隙

4 回答491 围观

问请问pcr内参很高是怎么回事呢？之前跑鼠没问题，但人的就很高？

爱吃水稻的小呆瓜

可能的原因有以下几点:1.RNA质量不行。具体就是RNA浓度很低，或者部分降解；2.cDNA浓度不够。检查cDNA是否稀释，反转录时RNA的量是不是不够；3.引物设计的不好。引物结合的效率不高，需要更多的循环数才能达到阈值；4.选择内参基因不对。不是所有物种和材料都是相同内参，可能前期要多选几个内参，看那个内参比较稳定

6 回答2443 围观

问IP实验

转云511

说明你的目的蛋白在野生型的细胞里也有表达，但是表达量很低。过表达的细胞里，目的蛋白表达量多。IP后，可以看到很明显的，过表达的蛋白条带要比野生型的条带粗的多。野生型在这里可作为对照，一个目地是看你的方法对不对，方法对的话，野生型是有条带的，要是没条带，说明IP的步骤有问题；另外一个目地是看，你的过表达细胞是不是目的蛋白真的过表达了，从条带的粗细可以看出来。

4 回答644 围观

问Raw诱导破骨细胞

丁香一方

图片不错，恭喜您，您诱导成功了

3 回答894 围观

问琼脂糖核酸电泳跑出峰状，求原因

爱吃水稻的小呆瓜

可能有以下原因供参考:1.点样方式不对。是否枪头戳到了凝胶；2.样品本身有问题。是否有杂质比如蛋白质污染等，建议点一个maker看一下条带；3.电泳缓冲液是否混匀。建议TAE或者TBE充分混匀，制胶和电泳液要一致4.电泳槽要水平

5 回答381 围观

问求助：把目的基因连接PET32a的质粒转化入BL21中，有单菌落，但是摇不起来是怎么回事呀

爱吃水稻的小呆瓜

1.检查抗生素有没有弄错；2.看一下这个质粒是多大，目的基因是多大，如果相对比较长的话，长的会比较慢，我之前一个8k的载体，连了一个11k的片段，长了三天才有；3.摇床的频率和温度是不是对的，有些菌要左右晃，有些要转圈晃

4 回答2138 围观

问做免疫组织化染色实验，片子上老是出现小水珠，如何解决呢？

小小袋袋

感觉首先应该更换脱水剂和透明剂。如果手工染色每提一步要充分沥干。减少前部液体对后面的影响。出现这种情况的切片首先二甲苯去胶。然后重新用好的试剂彻底脱水。再充分透明后。封片。如果为环保透明试剂应尽量晾干切片。

4 回答875 围观

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