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流失检测中多marker时荧光抗体的选择及补偿调节,真的要被补偿整懵了,看了很多原理都懂,但是实际操作还是磕磕绊绊
Eason老歌迷
没事,慢慢来,我之前刚做的时候也不太懂,对于荧光补偿的确定,需运用以上补偿的基本原理并结合特定的标本来实现。以FITC,PE双色分析为例:(1)先调节阴性对照管:将原补偿清零,首先调节电压,通过调节电压,使阴性群落在FITC和PE双阴性区。(2)FITC单染管:在理想情况下(没有荧光干扰),因检测管中不应该出现PE信号,但实际情况是在FITC与PE的双阳性区出现了荧光信号。这个信号就是PE探测器检
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MyD88抑制剂TJ-M201
Eason老歌迷
如果你刚开始做,我建议你做几次预实验,探索一下这个试剂的用量,做一个cck8看看最适浓度,然后你如果想偷懒,我可以给你分享一篇最近刚看的文献“新型MyD88抑制剂及其在脓毒血症中的应用”,一篇老文章。
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各位大神!我养的E15的胎鼠皮层神经元,感觉板子内有一部分长突起,一些不长突起,胞体也更小,找不到是什么原因,就是图中发亮的圆形
Eason老歌迷
这个不像是突起,有点像传代的时候细胞老化死亡的碎片。
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关于PCR,德塔CT值的问题,采用ARMS-PCR法但按照说明书需要判读德塔CT,这个德塔CT值的意义是什么呢
Eason老歌迷
我们都是用2的负ΔΔct值次幂来判断qpcr的结果,不用Δct值,Δct值是目的基因组减去内参组。
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跑胶拖带
whilt-shirt
有可能是模板出了问题导致没P出来
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CD3,CD28刺激PBMC中T细胞的激活
Eason老歌迷
之前看过一篇文献,分享给你,”CD3McAb,CD28McAb,CpG ODN刺激PBMC活化的研究”,讲的很清楚。
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电融合失败的细胞还可以进行手动融合吗,电融合会不会对细胞产生影响?
Eason老歌迷
电融合失败的细胞还可以进行手动融合,电融合会对细胞产生影响,但是你只要操作得当,并没有太大影响。
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问
什么是WB阳性对照?β-actin难道不是阳性对照吗?
whilt-shirt
阳性对照指的是肯定能够达到预期效果的刺激, β-actin只是内参
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求助🆘 有无大神讲解一下大鼠巨噬细胞抗体抗体ED1和ED2
Eason老歌迷
你查了这四种抗体的说明书吗?看文献里它们用什么抗体比较多呢?我觉得ED1和ED2,可以用CD68,CD163代替。ED1和ED2在做大鼠三叉神经冰冻切片免疫荧光时需要破膜通透处理。ED1是表示总的巨噬细胞。ED2是表示组织驻留型巨噬细胞。
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内皮细胞Cd31免疫组化染色
Eason老歌迷
石蜡切片脱蜡至水。3%H2O2室温孵育5~10 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。蒸馏水冲洗,PBS 浸泡5 分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。5~10%正常山羊血清(PBS 稀释)封闭,室温孵育10 分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2 小时或4℃过夜。PBS 冲洗,5 分钟×3 次。滴加适当比例稀释的生物素标记二抗(1%BSA-PBS 稀释),
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【求助】WB的抗体--氨基酸末端抗原
Eason老歌迷
没啥影响,可以正常购买。你可以去一个专门对比抗体的网站查看,或者去文献里查看他们都用的什么类型的抗体。
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急性毒性实验备用大鼠的目的是什么?
Eason老歌迷
先备用,以防万一,因为它们是一个批次处理的,具有实验对比性,如果大鼠不够再去另行准备就不是同一批条件不一样,出来的实验结果没有说服性。
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LTBR阻滞剂
Dr_劉医生
竞争性结合位点,一个抗原抗体结合,一个补体途径结合,应该通路,比如SSSLTBR-IgBaminercept阻断LTa1b2和LIGHT信号通路原发性干燥综合征
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agonistic mAb和普通单克隆抗体的区别
朱芮reda
可以混用,一个单抗,一个单抗抑制剂
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融合蛋白提问
bamboopiggy
你最好是在n端连GFP或者则就是c端去掉跨膜区以后,连GFP,否则,GFP可能检测不到。
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ip实验
冷泉港蛋白
你搜下,之前讨论过相关问题。涉及到蛋白互作研究的几个层次
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酶联免疫试剂盒检测细胞培养上清中的酪蛋白浓度时,若样本中酪蛋白浓度太低,怎样将样本浓缩?
麻黄连翘赤小豆
蛋白浓度低一般都没办法浓缩吧,除非和蛋白浓度高的样本混合
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问
免疫组化实验显色后必须要进行苏木素复染吗?
向日葵需要大太阳
这个是常规染色,苏木素染核更好得观察蛋白的表达位置,当然你也可以不染,但是呈现出来效果不太好
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问
请问ELISA试剂盒检测MAC-T饥饿处理后的细胞培养上清,为什么无法计算出酪蛋白浓度?
冷泉港蛋白
是不是试剂盒有问题?1.查下你买的试剂盒是否有引用文献 2.做个wb看下,抗体应该不贵
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问
请问小鼠带早起胚胎的子宫切片哪里可以购买到?
dxy_e21m06hw
我有,不过是自己做出来的,结果也很好,你需要吗
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