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问
如何消除对蛋白浓度的影响
balalaLy
选择合适的蛋白裂解液,裂解要充分同时要确保低温操作,防止降解
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问
杆状病毒感染细胞的病变形态
Eason老歌迷
看着有点像,还行,第一张怎么有一半没有啊?
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问
有用abclonal的fat4抗体wb跑出来的大神嘛
Eason老歌迷
我跑出来过。这不是abclonal的多克隆抗体吗,而且fat4它好像是460kda,比较大,很难跑,我当时弄了好久,增加了转膜时间和电流才跑出来。
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问
标准蛋白稀释呈不同浓度可以保存多久?
Eason老歌迷
标准品蛋白,我们都是现用现配,你不用提前给它稀释成不同浓度,没必要。如果提前稀释,你放-20℃可以保存半个月。
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问
HEK293S GnTi-细胞培养正常形态
Eason老歌迷
看着还行,挺正常的,体积大的细胞可能是有丝分裂期的细胞。
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问
用患者手术组织用于研究复杂么?
Eason老歌迷
不复杂,直接切下来切成小块,然后液氮冷冻即可,用的时候取出来,可以跑wb,qpcr,免疫组化等实验。
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问
WB检测LC3和p62均下调,但免疫荧光定量分析Lamp1也明显下降
balalaLy
试一下用rapamycin和CQ分别激活或者阻断自噬流看看结果能不能分析得通。
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问
T25瓶培养悬浮细胞,显微镜观察时需要摇匀后静置一段时间再观察吗
bamboopiggy
不用,拿出来以后,不用摇,直接镜下观察就可以
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问
请问半抗原结合蛋白载体之后是成为胸腺依懒性抗原还是非胸腺依赖性抗原?还是二者都有?它刺激B细胞产生抗体一定需要T细胞辅助吗?
Eason老歌迷
半抗原与蛋白质载体结合后,就获得了免疫原性。根据抗原刺激B细胞产生抗体是否需要T细胞协助分为两类:胸腺依赖性抗原和胸腺非依赖性抗原。
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问
合成的引物有退火温度,按照它的
申东熙老伯
可以的,也可以直接做touch downPCR。
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问
摇菌老是出现白色漂浮物是为什么?
申东熙老伯
白色漂浮物可能是泡沫,也可能是菌的产物,避开白色漂浮物,不会影响到结果。
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问
大肠杆菌中组成型中等或弱强度启动子
Eason老歌迷
通常使用的中等或弱强度可调控的启动子有lac(乳糖启动子)、trp(色氨酸启动子)、tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子)、lpl(l噬菌体的左向启动子)、t7噬菌体启动子等。
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问
HK-2细胞与LX-2细胞哪个好养啊,新手小白求帮助,家人,有没有养过的同学啊
秋秋欣欣
我觉得相比较HK-2细胞好养一些
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问
HE染色
秋秋欣欣
观察染色浸润程度,显微镜下目测评分
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问
构建重组质粒筛选蓝白班,没有蓝色菌落
dxy_n4jex0k8
重组效率高就没有蓝色啊。可以做个菌落pcr看看,如果都有目的条带就是重组率高。我们实验室都不做蓝白斑,仅是抗性筛选,做菌p二次筛选。
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问
关于FOXO3a蛋白的讨论,希望有做过的前辈给点意见,谢谢啦
秋秋欣欣
可以无血清和有血清做对比,重复几次
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问
杆状病毒系统,SF9,蛋白表达,讨论区
秋秋欣欣
将至少3种不同体积的病毒上清稀释液按计划加入至50 mL的Sf9和Sf21昆虫细胞培养体系中。在0, 24, 48,及72小时时取出固定份数的标准化细胞培养基并对细胞密度、生存能力、及随时间的大小变化进行评估。之后通过免疫蛋白印迹分析最终确定最优的表达条件。
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问
ROS胰酶选择
秋秋欣欣
影响不大,但是如果你细胞好消化的话最好还是用不含的
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问
小鼠灌胃
bamboopiggy
1.感觉确实是戳破食管了。2.没有出现死亡,是因为小鼠的食管比较长,一般不容易出现胃食管返流
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问
巨噬细胞既表达CD206又表达inos是啥啊
Dr_劉医生
两个不是一种,CD206是M2型巨噬细胞极化后高表达的共刺激分子,同理M1型则是CD80等;inos是诱导型一氧化氮合酶,是M1型巨噬细胞极化后高表达的中间产物,会促进炎性因子和趋化因子的大量释放。下面个图非常详细的总结了各类巨噬细胞的免疫功能;
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