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如何消除对蛋白浓度的影响
balalaLy
选择合适的蛋白裂解液,裂解要充分同时要确保低温操作,防止降解
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问
n=3的两组样本该选用什么统计方法?
Eason老歌迷
理论上你只有三个样本,也不符合方差分析的样本量,起码要有30个样本数据才可比较不过硬是要比较的话,也是用方差分析,采用t检验就是比较时就是容易犯两类错误的,正确的应该是采用方差分析。通过方差分析正明没有显著性,那就说明三组数据之间切实没有明显差异。
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问
多组比较-SPSS卡方求助
Eason老歌迷
分析时勾选期望值,看看4的期望值是多少,需不需要看校正卡方。写入文章的话,会有编辑审稿,不会嘲笑你。
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问
剂量反应Meta疑问
Eason老歌迷
如果你有四篇病例对照研究,一篇队列研究,如果使用stata的glst函数进行,可以同时合并。
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问
ipp6如何在选中的区域抠掉一部分计算面积
Eason老歌迷
如果你想扣掉空白部分,可以先把它们的色差,伽马值调整一下,然后把这白色的去除,然后在进行计算。
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问
关于450kd大分子量蛋白求助,内参没问题
bamboopiggy
你跑这么大分子量的蛋白,还是换用0.45um的膜比较好,然后买个跟你分子量差不多的marker,可以看到marker了,再 转膜,建议延长一下转膜时间,用marker来指示你是否转过去了。
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问
标准蛋白稀释呈不同浓度可以保存多久?
Eason老歌迷
标准品蛋白,我们都是现用现配,你不用提前给它稀释成不同浓度,没必要。如果提前稀释,你放-20℃可以保存半个月。
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问
SDS- PAGE电泳图为什么这么脏!
Eason老歌迷
云雾状东西我也出现过,是配考马斯亮蓝溶液过滤时,没有过滤好,不过没有关系,你可以用个小镊子轻轻的刮一刮,就可以把云雾状东西去掉,小点一般也可以去掉,如果是胶里的东西说明配的胶有杂质,可以重新配。
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问
求助丨质粒在革兰阴性菌中是如何进行双向复制的?
Eason老歌迷
质粒的双向复制:构成DNA链的两条核苷酸链是反向平行的,因此复制叉向两侧推进时,如果起始点处A链合成方向为5'到3',那么在B链上是3'到5',这个反向推进的DNA复制行为后来被日本分子生物学家冈崎夫妇在1967年证明是不连续合成。先在B链上以DNA为模板生成一段接一段的不连续少量RNA小片段作引物,随后以5'到3'方向延伸成为一个个DNA-RNA片段杂合链,再去除引物,把这些一个个的小片段连在一
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问
MEP酵母菌株
Eason老歌迷
楼上实验室师姐有,你是想要这个mep酵母菌还是想咨询问题。
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问
HEK293S GnTi-细胞培养正常形态
Eason老歌迷
看着还行,挺正常的,体积大的细胞可能是有丝分裂期的细胞。
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问
杆状病毒P1感染sf9细胞状态
Eason老歌迷
看这个状态,有点像是发生污染了。你用高倍镜观察一下这些细胞的状态和这些小黑点。然后看看培养基是否混浊,里面是否有小黑点游动。
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问
细胞免疫荧光求助
bamboopiggy
1.你这个感觉是细胞太多了,不在一个层面所以dapi拍的模糊。2,细胞透不透化,要看你的实验目的,如果是膜蛋白不用,如果是细胞内的蛋白,则必须透化。3,你看看你的盖玻片干净不,还有就是盖玻片周围有封胶么?胶封的太厚,可能会卡在在物台上,从而导致层面不一。
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问
WB结果
bamboopiggy
marker没问题,所以胶应该问题,出现这个样子,感觉就是你蛋白浓度太大了。
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问
白血病THP-1细胞裸鼠皮下成瘤大概需要多久的时间?
Eason老歌迷
根据肿瘤细胞的特性和接种细胞的量,一般皮下成瘤的周期为1-2个月。肿瘤大小测量一般为1周两次。
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问
悬浮细胞如何观察死细胞?
bamboopiggy
这个不太好看,一般如果细胞增殖比较快的话,看细胞的数目增加。一般死细胞可能有形态的改变,不那么圆,有毛刺,贴壁等
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问
Ros问题
Eason老歌迷
是不是你的抗荧光淬灭封片液加少了?
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问
内皮细胞处理培养基问题
Eason老歌迷
7天,肯定是会有影响的。但是我感觉7天之内DEME不太会对这个内皮状态造成太大影响。。
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问
杆状病毒系统,SF9,蛋白表达,讨论区
秋秋欣欣
将至少3种不同体积的病毒上清稀释液按计划加入至50 mL的Sf9和Sf21昆虫细胞培养体系中。在0, 24, 48,及72小时时取出固定份数的标准化细胞培养基并对细胞密度、生存能力、及随时间的大小变化进行评估。之后通过免疫蛋白印迹分析最终确定最优的表达条件。
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问
可变剪接设计引物
秋秋欣欣
Gene,搜索选择相关的不同的isoform:点击其中一个isoform,复制全部序列到snapgene把四个isoform全部保存:点击第一个进去,进行编辑:首先在NCBI GENE里找到CDS(编码区),复制,ctrl+F到snapgene里,Features-add feature,命名为COS,其他三个isoform复制进来:这里的红色就代表外显子跳跃事件,我们将外显子跳跃事件的碱基复制,
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