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PCR扩增3Kb基因片段
汤姆卜丽波
不算特别大,可以p出来的,我们p过
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问
接种环划板后酒精灯火焰烧灼后,再次沾取菌液后菌液有黑色物质。对菌液有影响吗?
凌晨三点Dxy
应该是上一次菌液被灼烧碳化物,如果已经冷却了,问题不是很大,接种环灼烧后,如果用无尘纸擦一下也会擦出黑色物质,就是些碳化物啦
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问
PC12细胞生长异常
whilt-shirt
大概率是污染了,建议重新复苏细胞吧
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问
动物行为学的数据分析方法
汤姆卜丽波
这个需要你自己统计根据时间频率制表,然后统计软件进行相关性分析
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问
菌液活化过程中,大肠杆菌在加了氨苄的固体LB上可以长出单克隆,但是将单克隆挑取到液体培养基上怎么都长不出来,可能是什么原因呢?
申东熙老伯
注意一下是不是氨苄的平板出现了卫星菌落,这样挑的菌抗性丢失,在液体培养基菌长不起来。
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问
请问除了使用质谱和核磁共振法,怎么确定一个蛋白质被糖基化修饰了?
汤姆卜丽波
糖基化位点的确定方法还可以用① PNGase F酶法;②Endo H酶法;③三氟甲基磺酸(trifluoromethananesulphonic acid,TFMS)法。
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问
不同内参差距过大怎么办
bamboopiggy
gapdh大概34,actin 43,tubulin在55以上,这个看你要怎么切你的目的蛋白,一般内参实在不行可以先显一个,然后不好的化,striping了,再加另外一个抗体也可以。
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问
想探究动物体内某mRNA的半衰期,可以注射放线菌素D来抑制转录,再在不同时间点测定mRNA含量吗?
bamboopiggy
这个实验你最好用细胞来做,放线菌素D,在体内的作用浓度,尤其是你要取得那个部位,可能不好确定。
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问
跑蛋白电泳时,loading已经跑到最下面了,但是marker之间的距离有点短,能不能加长电泳时间,蛋白会不会跑出去
balalaLy
就是你的蛋白还没有跑开,不要看loading,看Marker,只要你的目的蛋白没有跑出去就行
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问
请问怎么两条DNA链杂交,怎么模拟二级结构,计算自由能呀?
bamboopiggy
你习惯用什么软件设计引物?一般设计引物的软件都可以模拟,例如vector NT,或者snapgene
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问
双荧光素酶报告基因实验,研究miRNA与靶基因互作时,转染的miRNA的量与质粒的量如何确定,以及二者的比例有一个推荐值吗?
bamboopiggy
这个你只能自己做预实验来摸,每个的条件可能都不一样。
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问
求助Aβ孵育神经元细胞问题!
识迷途stray
看看Aβ的效果做个浓度梯度,如果每个浓度都一样可以看看换个厂家
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问
油红O染色
bamboopiggy
MDA-231是乳腺癌细胞系,你是怎么处理了以后,要染油红O?这个你最好设一个可以染出来的阳性对照,否则,不好说。
2 回答
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问
小样本正态性检验的问题
且行且尽力
既然你用SW检验不符合正态,那应该就是数据有问题,不能看目测,要有统计学依据
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428 围观
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问
Hoechest/PI染色
汤姆卜丽波
你不看染色荧光,这个是软件统计需要的,你需要图还有就是软件统计的正常细胞和凋亡细胞的量,算趋势
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问
染色质免疫超声时片段不碎该如何解决?
bamboopiggy
先确定你的超声破碎仪的参数是对了没有,然后做预实验,把你 超声后,跑胶的图发上来看看,那个是看不到很清晰的条带的,都是些smear的band
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577 围观
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问
请问病毒滴度检测用QPCR法,前面病毒的预处理是怎么处理?双链RNA病毒
汤姆卜丽波
有专业的纯化试剂盒,直接病毒纯化
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问
请问大家做CHIP实验跑Q-PCR的引物是找公司设计还是自己设计的呢?
万能小宇宙
如果不计较成本的话,公司设计验证是最方便的,售后也会一并解决,如果实验要考虑整体成本,引物设计相对不是很复杂,自己设计就可以的。
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问
请问一下买的sigma完全弗氏佐剂可以直接右后足皮内造AA模型么?还是需要加液体石蜡?
天一湖医者
sigma完全弗氏佐剂需要加液体石蜡。
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问
jurkat
毕业不头秃
一般好像就用PMA+ionomycin去活化,或者再加Brefelding A让细胞因子在胞内聚集方便检测。
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