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问
跑wb遇到了一些问题?
juyue2010
查询一下这种细胞常用内参,可能是你稀释比例有问题,或抗体失效
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问
将引导电极置于体表或体内任何部位,为什么均可引导记录到心脏的生物电活动?如果将心脏取出结果又将如何,为什么?
土井挞克树
心脏跳动的时候还可以检测到,不跳动就检测不到了
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问
想用流式分巨噬细胞,需要怎么处理组织?
土井挞克树
可以从PBMC中通过阴选试剂盒分离较纯的、有活性的单核细胞。也可以用CD14、CD64和CD192作为人单核细胞的特异性标志物通过流式分选出单核细胞。原代人单核细胞可以在体外培养,需要注意的是,在血清或M-CSF存在的5天内,培养的单核细胞将开始分化为巨噬细胞。单核细胞以粘附和非粘附细胞的混合形式生长,粘附细胞的比例取决于培养基和刺激因子。除了原代单核细胞,人外周血单核细胞系THP-1也常用于对单
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问
流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?
土井挞克树
信号检测时,每一个细胞通过激光,机器的探头都会检测到一个荧光信号,在内部产生一个电脉冲信号(波),这个信号机器记录为一个峰值,每一个峰值都有三个参数,高度(H),宽度(W)和曲线下面积(A),H 和W都是直接测出的,而A是根据机器的设置就算得出。这三个参数都可以作为流式细胞仪结果图的坐标。比如PI(FL-2,老式的机器用这个来表示荧光通道的数目,一般是1-4)的信号,既可以用PI-H来作图,也可以
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问
免疫组化的抗原修复方式如何选择
土井挞克树
第一种:细胞质抗原修复绝大多数细胞质抗原不做任何修复,一般也能获得相对稳定的染色结果。但采取一些抗原修复方法,可以是抗原决定簇释放的更加充分,进一步提高结果的可靠性和敏感性。所以我们一般采取的是强度适中,反应相对温和的抗原修复方法。推荐使用微波修复法。推荐的方法:微波加热修复法推荐的修复液:常用柠檬酸盐缓冲液(pH=6.0)第二种:细胞膜抗原修复绝大多数细胞膜抗原如果不做任何修复,它的显色结果相对
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问
兔子冠状动脉
土井挞克树
给你推荐一篇文章,文章里面写的很好
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问
流式中检测细胞表面和细胞内蛋白表达水平的抗体有什么不一样吗?
土井挞克树
抗体只是针对相应抗原的,至于是针对胞内还是胞膜对你检测来说并无明显影响,你只需要查清楚到底是针对哪一个部位的抗原的,应该是可以用同一种抗体进行检测的,在流式操作时只需注意:如果是针对胞内,则需要加破膜剂,让抗体能和相应抗原接触,否则就不需要了。
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问
使用 DSS构建IBD小鼠模型的时间?
土井挞克树
造模方法:Balb/c小鼠适应性饲养1周后进行实验,小鼠于第 1~5 、第 11 ~ 15 、第 21 ~25 天分别灌胃3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液,其余时间给与蒸馏水,共30天,建立慢性结肠炎模型。造模成功后,药物组分别每天灌胃低中高剂量药物水溶液,正常组和模型组灌胃等量蒸馏水,连续给药7天后取结肠组织进行HE染色,ELISA检测炎症因子IL-1β和TNFα含量。模型验证:HE染色
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问
elisa检测炎症因子
juyue2010
检测组织表达,肠腔属于体外了。
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问
做流式消化染抗体后不固定,可以第二天上机吗?效果影响会很大吗?
土井挞克树
不可以你可以固定好隔一天上机,但是不可以不固定
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问
做免疫组化,不同组织怎么取材,才能有代表性?
土井挞克树
给你推荐一篇文章,这篇文章里面很全
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问
免疫组化,特征性如何,什么情况会出现假阳性?
土井挞克树
1. 消除病理性色素的影响: 当所检动物由于出血等原因造成吞噬含铁血黄素细胞增多时,为防止其与 DAB 显色呈现的黄褐色发生混淆,优先选用AEC显色剂。组织固定时间过长时,切片中容易产生福尔马林色素颗粒,影响结果观察,取材时应充分用流水冲洗,以消除影响。 切片制作不当引起的非特异性着色 在严重变性、坏死及炎性病灶处,在胶原纤维和结缔组织部位,在切片裱贴不平、折皱处以及组织边缘部位常会出现非特异
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问
免疫组化,一般切多少张片子,组织没有固定,冻融过,还能用吗?
土井挞克树
10-15个吧 ,没有固定冻融过最好不用了
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问
免疫组化,是否能够定量,怎么实现?
土井挞克树
可以的,先把免疫组化做了然后 用imageJ 分析
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问
心脏导管取血,经过大的血管怎么避免血管内皮损伤?
土井挞克树
操作轻柔,减少与内壁的摩擦。多加练习
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问
流式细胞检测什么时候需要去黏连?什么时候用fsc的信号去黏连,什么时候用荧光信号去黏连?
土井挞克树
在流式检测中,我们需要进行单细胞分析,有时样品中会混有两个或多个细胞的聚集体,这个时候需要去粘连
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问
细胞转染,免疫共沉淀的相关问题?
juyue2010
若不是分泌蛋白,它会在细胞膜外,取细胞裂解液
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354 围观
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问
当分子A被敲低或敲除时,分子B可以替代分子A的作用,此时分子A和分子B是什么关系,替代关系吗?
juyue2010
不是替代,是补偿或代偿关系,生物中很常见。
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问
流式细胞周期实验中,G2期细胞比例异常的低,百分之2.多,如何解释?
elabscience
进行周期检测时,发现G2/M期缺失,首先要确定我们所检测的细胞是能够进行分裂增殖的,如:外周血淋巴细胞在正常情况下基本都是不会进行增殖的,处于G0期。此外,如果细胞培养条件不对或营养不足,引起细胞生长缓慢,也会导致大量细胞进入G0期。此时需及时优化培养条件,否则时间一长会引起细胞状态变差,直至细胞死亡。很多细胞生长密度过高,会出现接触抑制,同样会导致G2/M期缺失。当细胞产生接触抑制,就无法再增殖
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1565 围观
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问
ELISA洗板时的问题
土井挞克树
当然有影响,实验步骤一定要严格操作。
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378 围观
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