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问
请问各位前辈,小鼠mcao结束后不停的翻身是出血引起的吗?
sswei
先看是否有蛛网膜下腔出血,还要再看是否有严重的半球水肿。
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问
求助!Microbiology Spectrum一直处于Under Peer Review状态!
周末也要努力呀
可以催一下,这个杂志新出不久,我们去年中了一篇,所以周期没有形成规律有长有短的。虽然现在分数降了但是双一区以后好会升的,祝好运
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问
如何用考马斯亮蓝检测蛋白质的浓度?
sswei
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作试剂:1、 考马斯亮蓝试剂:考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。2、 标准蛋白质溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.
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问
marker上4ul,显影目的蛋白没有条带(marker左图,标准品右图,标准品1ng和10ng)?目的蛋白标准品上样量多少合适,
周末也要努力呀
一般30微克左右,表达量低的要50-80微克,根据结果条带深浅调整
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问
细胞状态老是不好,求助
sswei
在细胞融合度达到70—80%时传代,不要过满,及时换培养基
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问
尿液中 17-酮类固醇测定实验
周末也要努力呀
这是因为氢氧化钾具有碱性,可以使间二硝基苯发生酸碱反应,生成相应的盐类。这种盐类在显色试剂中具有特定的颜色,可以通过显色来判断尿液中17-酮类固醇的含量。具体的反应机制如下:间二硝基苯 + 氢氧化钾 → 间二硝基苯盐 + 水显色试剂中的间二硝基苯盐具有特定的颜色,可以通过比色法或光度计等方法测定其吸光度,从而间接测定尿液中17-酮类固醇的浓度。
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问
软琼脂克隆形成实验
高山云初
黄色就是独立的菌落,直接显微镜下看
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问
显微镜检测法
feixue7758527w
我觉得可以采用染料SYBRgreen和碘化丙啶(PI)双染色判定细胞死/活的流式细胞仪分析方法
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问
腺病毒包装流程、注意事项与常见问题
粥辰辰辰辰
1)进行腺病毒包装相关实验时,穿好实验服,佩戴护目镜、口罩和手套,皮肤不要裸露在外,务必在生物安全柜(BL-2级别)内操作。(2)若操作时生物安全柜内有病毒污染(病毒液体溅出),立即用70%乙醇加1%的SDS溶液擦拭干净。(3)腺病毒包装相关实验使用过的枪头、细胞培养皿、EP管和废弃物等用消毒剂消毒、灭菌后(84消毒液和高温灭菌),再进行统一处理。(4)腺病毒包装相关实验完毕后,仔细清洁双手。
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问
请教法夫酵母原生质体转化的具体方法。
周末也要努力呀
1. 制备载体:将目标基因克隆到适当的载体上,例如质粒。2. 转化酵母细胞:将制备好的载体转化入法夫酵母细胞中。有几种常用的方法可以实现转化: - 钙离子法:将法夫酵母细胞与质粒混合,加入含有钙离子的转化缓冲液中,通过热冲击或电击使质粒进入细胞。 - 锂离子法:将法夫酵母细胞与质粒混合,加入含有锂离子的转化缓冲液中,通过热冲击或电击使质粒进入细胞。 - 冻融法:将法夫酵母细
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问
DC细胞的抗原提呈实验步骤?
周末也要努力呀
BMDC细胞(骨髓源性树突状细胞)的抗原提呈步骤如下:1. 骨髓细胞分离:从小鼠骨髓中分离出BMDC细胞。2. 培养:将BMDC细胞在培养基中进行培养,以促进其增殖和分化。3. 处理抗原:将目标抗原加入培养基中,使BMDC细胞摄取抗原。4. 抗原处理:BMDC细胞内的抗原被降解成小片段,并与MHC分子结合。5. MHC分子表达:MHC-抗原复合物被转运到BMDC细胞表面,并在细胞膜上表达。6. 抗
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问
提RNA加入氯仿离心后取上清,再向上清中重新加入trizol和氯仿提一次,需要加多少的trizol和氯仿?
周末也要努力呀
你加的太多了,可以加300trizol和60微升氯仿
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问
pcr产物双酶切后连接只长出原载体,请问哪里出了问题
高山云初
可能是酶切失败,内切酶特异度不足导致的
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问
用于测定水质p的钼酸铵溶液 可以保存多久呀
土井挞克树
避光保存最长可以6个月,超过六个月不建议使用
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问
关于转录组与代谢组差异筛选
土井挞克树
一般在样本量不足或者样本量不均等的时候需要调整p值
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问
印三酮法测脯氨酸含量中 ,配置100微克每毫升的脯氨酸溶液制作标准曲线是什么意思?怎么制作
周末也要努力呀
标准曲线是为了后续测出OD值兑换成对应的你需要的组间浓度,标准曲线根据标准液体稀释成不同的浓度梯度制备。后续只需要检测OD值就可以知道浓度了。
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问
ris-Glycine凝胶,Bis-Tris(MOPS)凝胶,Bis-Tris(MES)凝胶、在电源时如何选择、他们的原理是什么
土井挞克树
Bis-Tris 类凝胶系统是一种预制聚丙烯酰胺小型凝胶系统,可对非变性蛋白和蛋白复合物进行灵敏的高分辨率分析、分子量估算和纯度评估Bis-Tris 凝胶的工作原理在 SDS-PAGE 中,SDS 充当电荷转移分子,它可以让蛋白带净负电荷,从而使蛋白变性并向阳极迁移。BN PAGE 采用考马斯 G-250 染料作为电荷转移分子,该染料附着在蛋白上使其带净负电荷,同时保持蛋白处于非变性、天然状态。N
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问
(小白提问)请问对肿瘤细胞系构建过表达和敲低组时,用来对照的OE-NC和si-NC分别进行了什么处理呢?
dxy_mqg1dtg8
你的理解是对的。对于过表达实验,实验组会将目的基因的过表达质粒转染到肿瘤细胞系中,而OE-NC组则是将空质粒转染到肿瘤细胞系中作为对照。因为空质粒不会对目的基因表达产生影响,所以OE-NC组可以作为背景噪音的对照。对于敲低实验,实验组会使用siRNA转染将目的基因敲低,而对照组则会使用阴性对照siRNA转染,通常选择与目的siRNA序列无关的、不会对目标基因表达产生影响的siRNA作为阴性对照。这
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问
PEDV一种病毒,大家是怎么分离的呀,求救
dxy_mqg1dtg8
PEDV(猪流行性腹泻病毒)的分离通常涉及到以下步骤:1. 采集病毒样本:从猪体内的粪便、肠道、血液等样本中采集病毒样本。2. 病毒富集:将采集到的样本进行离心、过滤、超速离心等操作,以富集病毒。3. 细胞培养:将病毒样本接种到感受器细胞上进行培养,例如Vero细胞、PK-15细胞、LLC-PK1细胞等。4. 病毒分离:观察细胞的形态变化、病毒感染的效果等,通过形态学和免疫学等方法进行初步鉴定,筛
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问
【求助】多糖去蛋白
dxy_k2sipqk6
请问一下你弄懂这个了吗?我也是看不懂这个,我用文献说的5%的三氯乙酸溶液去除蛋白,完全没有沉淀
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