过氧化氢氧化损伤模型？

请问楼主用过氧化氢建立氧化损伤模型成功了吗？重复性好吗？

先确定IC50,再做功能表型，比如测ROS，线粒体膜电位等反映氧化损伤的指标。

做流式细胞术检测可以区分或者PI/钙黄绿素染色

一般是看sod的活力显著降低就代表模型损伤成功

细胞受到H2O2损伤后，细胞内生成大量活性自由基，引发细胞膜上脂质过氧化反应，生成终产物MDA；并且大量损耗细胞内源性抗氧化剂如GSH等 破坏细胞内氧化与抗氧化平衡使细胞处于氧化应激状态。 同时,受损的肝细胞膜通诱性增强，胞内酶如转氨酶等大量释放至培养液。因此，除MTT法检测细胞生长抑制率外，培养液中ALT、AST和LDH活性检测亦有助于确认模型的构建是否成功，特别是细胞抗氧化活力的变化可更准确地描述氧化损伤模型的功能。

构建成功的判断标准是引起细胞氧化应激的同时

对细胞造成较小的损伤(实验组与对照组相比ROS水

平升高，实验组与对照组比细胞存活率没有明显差

异)。

判断指标:MTT、CCK8等测定细胞存活(通常

做法为利用将细胞铺到96孔板中，用不同浓度应激

源处理相同时间后检测细胞活性);流式检测凋亡情

况，WB检测凋亡marker变化情况;DCFDA法测定

ROS(最直接的方法，DCFDA是一种通用的氧化应

激指示剂。具细胞膜渗透性，本身无荧光