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问
免疫组化芯片颜色偏深
土井挞克树
那可能是孵育时间不同导致的,孵育时间太长也会颜色偏深
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问
请问在WB电泳的过程中,样品会有逸散,如图所示,请问是什么原因呢
balalaLy
可能是跟buffer中甘油的含量低有关,这种一般影响不大的。
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问
胶浓度的选择,12%或者15%?
balalaLy
都可以,小分子蛋白肯定是越高浓度的胶越能分得开,如果不需要兼顾其它大分子的蛋白就选15%的
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问
非特异性染色这个困扰问题
此用户已注销
1抗用多克隆抗体容易出现非特异性染色,建议用高纯度,高效价的针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体来解决。单克隆抗体很贵,不过结果真的很好。2一抗浓度太高也是出现非特异性染色的常见原因。解决的办法就是预实验。 3DAB的孵育时间过长,会造成背景非特异性染色。
4 回答
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问
如何使对照组的数据归一
huarenqiang5
可以用“Z-score标准化”和“按小数定标标准化”使对照组的数据归一
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问
DLBCL细胞系OCI-LY8和OCI-LY18属于GCB亚型还是ABC亚型呀?求求帮助
huarenqiang5
GCB亚型包括DLBCL细胞系的OCI-LY8和OCI-LY18
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问
有用过Nc/Nga小鼠,做特异性皮炎实验吗
huarenqiang5
可以做,借鉴下面文献进行参考。
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问
求助:Co-IP结果图怎么看,里面的ib、ip是什么意思?
此用户已注销
IP:immunoprecipitation 免疫沉淀(纯化目的蛋白)IB:immunoblotting 免疫印迹,即Western Blotting(显示目的蛋白)
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问
做WB杂交检测一个比较大的蛋白的表达量,需要跑很久吗
huarenqiang5
电泳时间:选择分子量最大的预染MARKER,用250kd,然后在电泳槽周围堆满冰,120ma使劲跑吧,跑两个小时换一次电泳液,一直跑到250kd的MARKER,离开胶释放到电泳液中,大概要用5个小时。这时候400kd的蛋白在离开浓缩胶边缘0.5~1cm的地方。
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问
明胶酶谱
huarenqiang5
可能是电泳操作不对,配胶不均,温度控制不当等。
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问
细胞污染
huarenqiang5
你这个看起来不像是污染,没有必要进行处理。
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问
EMSA冷探针竞争失败
huarenqiang5
可能是:1. 加竞争探针时候加错了又把标记的探针加了一遍。2.如果没有,你在重复一下实验,有时候在封闭和洗涤的时候整个膜不是很均匀,就会出现在某个部位出现比较深的背景, 有可能刚好是在竞争的地方出现的。
2 回答
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问
小鼠骨髓移植时候,各个供鼠骨髓细胞提取之后可以混合起来移植么?
sswei
尽量不要混合,否则可能会引起细胞之间免疫反应,从而影响结果
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问
RAW264.7分化?
土井挞克树
你这个没有分化,镜下视野几乎都是杂质和细胞碎片,细胞裂解过多,你需要重新做
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问
求助 各位大佬帮帮忙啊raw264.7细胞抗炎做wb一直压不出条带来,有什么原因啊,转膜丽
麻黄连翘赤小豆
如果是压不出差异条带的话,你就要考虑是不是你养细胞的问题或者药物问题
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问
如何在细胞水平证明巨噬细胞中一个基因的功能?
荒诞小说
raw转质粒好转吗?我实验室的师姐说这个细胞基本转不好质粒。她后面用的是慢病毒。你可以参考一下。
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问
raw264.7细胞形态是否正常,用来做动脉粥样硬化的模型
荒诞小说
看细胞形态还可以,圆圆的也没怎么分化,就是有点聚团生长。建议传代时轻柔吹打聚团细胞至单细胞和减少传代比例。
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问
edu细胞增殖染色的问题
荒诞小说
10uM有点太低了。建议增加EdU浓度和延长培养时间。你的细胞是什么细胞?不同的细胞培养时间不一样。一般的细胞是2h左右,但也有例外,比如神经细胞,培养时间就要延长。另外,EdU试剂盒有个非常需要注意的问题是,染色的试剂需要按顺序配(血的教训,没有按顺序配,就没有染上)
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问
巨噬细胞Raw264.7培养以及极化问题
荒诞小说
我养raw都是用的DMEM高糖培养基+BI血清。细胞刮传代,传代时轻柔吹打,因为机械刺激也会诱导raw分化。M0的raw是透亮的圆形,分化的raw会变形长角,同时贴壁会变牢固,不易传代。
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问
巨噬细胞RAW264.7超难养,说好养的多半是极化了都不知道,请教各位从实验仪器到细胞培养,传代,铺板一系列问题?跪谢了
wwwwhc
一般可以用细胞培养皿🧫。传代可以用细胞刮刀把细胞刮下来,离心,换新培育基,再轻轻吹打散,传代到新细胞皿。铺板的按需要的浓度稀释后,中板即可。
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