非特异性染色这个困扰问题

1抗用多克隆抗体容易出现非特异性染色，建议用高纯度，高效价的针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体来解决。单克隆抗体很贵，不过结果真的很好。2一抗浓度太高也是出现非特异性染色的常见原因。解决的办法就是预实验。 3DAB的孵育时间过长，会造成背景非特异性染色。

主要原因有下面几点：

1、存在内源性酶和生物素。

2、如果一次性染太多片子的时候，容易出现组织变干，会导致非特异性染色。

3、如果切片在缓冲液中修复液里面浸泡时间过长，会导致非特异性染色。

4、抗体浓度过高。

5、清洗不充分。针对这个问题清洗一定要充分，PBS液体一定要双蒸水新配，用之前再次测定pH值。

6、如果选择了不正确的封闭血清，也会导致出现非特异性染色影响检查的结果。

抗体浓度过高或者孵育时间过长也会非特异性染色

你的一抗是单抗还是多抗呢，单抗的话非特异性染色就会少一些