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问
50毫升的制胶的29比1里边混了个3毫升水 不小心加错了 请问这个29比1还能用吗?
土井挞克树
胶的浓度偏低,但是胶的最佳浓度是一个范围,所以可以用
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问
小鼠原代T细胞的培养
huarenqiang5
小鼠脾脏磁珠分选初始T细胞可以用慢病毒表达
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问
腹腔注射BAPN(氨基丙腈)+Ang 2(血管紧张素2)胃下部小肠化脓表现是什么原因?
huarenqiang5
考虑是穿刺消毒不严或其他原因经注射针头将细菌带入腹腔或穿刺针刺入胃及小肠导致
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问
X-33毕赤酵母诱导表达发酵液变绿
huarenqiang5
正常现象。在做毕赤酵母离心实验时,发酵液高速处理后,附着在离心管内的沉淀是发绿的,是里面的大肠杆菌菌群,属于正常现象,对结果没有影响。
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问
为什么蛋白杂到两条带??
土井挞克树
我觉得最合理的解释就是同时存在两种蛋白,也就是说有混杂因素。
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问
主成分分析
huarenqiang5
主成分分析适用于数据类型是二分类的计数资料,主成分分析(PCA)是一种分析、简化数据集的技术。通过降维技术把多个变量化为少数几个主成分(综合变量)的统计分析方法。 主成分分析经常用于减少数据集的维数,同时保持数据集中的对方差贡献最大的特征。
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问
琼脂糖凝胶电泳老是拖尾,求各位大神指点一下
huarenqiang5
1、 可以考虑是不是样品不纯; 2 、注意上样浓度; 3、可能是原液浓度太大造成的; 4、可能DNA已降解。 5、提取前是否对样品进行一定的脱腐处理。 6、 DNA上样量过多。 7、 是否有蛋白污染。
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问
求问DNA片段连接pEASY vector
huarenqiang5
建议用质粒、电泳、菌落PCR进行验证,也可能是菌液时,细菌表面的质粒已被稀释了很多倍,所以P不出来。
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问
sgRNA设计相关
huarenqiang5
病毒基因组在进入宿主细胞之后,可以视为宿主细胞的一部分
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求助原代细胞培养问题,角质细胞
huarenqiang5
你的这个情况主要是提取的细胞数量不够导致
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问
求助| 消化法取的原代细胞状态很差怎么办
huarenqiang5
不同的消化酶培养液牌子可能会影响消化的效果,组织的肥瘦肯定会影响消化的效果。
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肾脏足细胞培养
huarenqiang5
虽然原则上认为,在33℃细胞增殖,37℃细胞分化,但足细胞系在37℃也生长。建议你把分化的时间延长一些,从33℃接种至37℃时应尽量细胞密度稀一些,可在37℃传一代之后再进行下一步实验。
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问
求用BEAS-2B细胞做侵袭实验的小伙伴
huarenqiang5
1、ECM铺得太多。过多的ECM可能会堵住孔,尝试使用少量ECM或者其它种类的ECM。2、气泡聚集。小室下面的气泡会妨碍细胞迁移,导致局部无细胞迁移。可以先放入小室,再先加培养基,避免气泡产生。3、对细胞没有进行饥饿处理,以及需要设置上下室培养基的FBS浓度梯度。4、对细胞的刺激没有促迁移作用。确保采用适合该细胞迁移的刺激以及正确的浓度。设置阴性和阳性对照组。
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问
pbs稀释液
huarenqiang5
一般通过肉眼看不出来,但是为了实验的准确性建议重新做
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问
Masson染色马松染色定量分析问题
huarenqiang5
可以用选整张片子分析染色面积,这样简单
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问
高尔基染色分析
huarenqiang5
通过 3D 扫描仪扫描仪或正置显微进行图像采集,选择第二或第三级树突进行定量分析,通过 Image J 软件计算树突棘数量。
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问
原代神经元提取培养
huarenqiang5
你这个很好,继续实验,期待好的结果
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问
提取乳鼠肝原代细胞
土井挞克树
1、 4套剪刀镊子,高温高压灭菌(分别用于剪皮,开腹,剪断下腔静脉和剪下肝脏,肝脏剪碎)。2、配置好的灌流液,消化液(一定要37℃预热!!!)。重悬过程中用的DMEM一定要预冷!!!3、适龄小鼠4、灌流泵调节好转速
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问
有没有养过N2a细胞的?细胞三天传一代,正常吗?总感觉它比HT22细胞生长慢,不好养
huarenqiang5
你这个是正常情况,一般N2a细胞2-3天传一代,不能心急。
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问
提取的RNA跑胶有四条带,这是因为什么呀,这样还能做qpcr吗?求大神帮忙分析一下
土井挞克树
可能是因为rna之间的局部缠绕,不影响的。
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