求助 | 缺氧处理后测目标蛋白，免疫荧光有显著差异，WB结果几乎无差异。
AlanNeko
细胞缺氧处理后测目标蛋白，免疫荧光显示缺氧组和对照组差异显著。但是WB结果缺氧组对照组目标蛋白相对含量几乎没有区别。请问各位老师前辈这可能是什么原因？
4 个回答
huarenqiang5
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1、选择表达量高的细胞作为阳性对照，用于确定检测样本是否为阴性。
2、提高上样量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制剂。
申东熙老伯
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多重复几次，一次结果无差异说明不了什么，也可以再做做定量PCR看看。
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一是目的蛋白表达量过低，无法达到 WB 检测下限；二是在样品制备过程中，目的蛋白发生了丢失。总的来说，就是蛋白样品出了问题！
土井挞克树
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大概率是抗体的问题，wb和免疫荧光抗体一般不通用。
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