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问
fluo—3am或fitc 单通道 流式分析方法求助!!
土井挞克树
进行流式细胞仪检测,Annexin V-FITC为绿色荧光,PI为红色荧光。注意:FITC为绿色荧光,此检测方法不适用于已带绿色荧光标签的细胞结果示例及分析四个象限的意义左上/P2-Q1:坏死细胞;右上/P2-Q2:晚期凋亡细胞;右下/P2-Q3:早期凋亡;左下/P2-Q4:未发生凋亡的细胞。细胞凋亡率:P2-Q2与P2-Q3象限百分率的和。
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问
请问做细胞代谢组学如何养细胞已以及如何收养
balalaLy
就是正常养,加药物预或者造模后收集细胞或者培养上清
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问
电转了四次,污染了三次,污染源一摸一样,都是杆状的细菌,培养基里面有双抗,而且每次都很小心了,但是每次电转都污染😭😭😭
huarenqiang5
估计还是你电转时操作引起或抗体等被细菌污染了
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问
论文里这样的图是怎么做的?
juyue2010
A图PPT就可以做,发表图一般会用到AI, B图常见的软件都可以,graphPad,origin
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问
flag标签融合蛋白ELISA试剂盒
juyue2010
看看abcam有没有,国产的是会出现一些问题
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问
求助|细胞加药时机
huarenqiang5
每个细胞都不一样,一般是细胞长到80%的时候可以铺板你可以先做个生长曲线,确定最佳的铺板密度和生长时间,比如PC12就加药6小时就行,而Sao-2需要48小时,一般你可以试试培养12小时你是一次性把细胞接种到6孔板或12孔板中吧做药物时间实验, 一般采取"倒叙法". 假设要检测0到72小时药物处理的细胞, 每24小时为一个点. 操作:1. 以一定密度种细胞各个时间的和重复的细胞一起种上,带细胞贴壁
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问
C2C12成肌细胞培养形态异常,求帮助!!
huarenqiang5
成肌分化过程中会有少量细胞凋亡,属于正常现象。首先要在培养上下功夫。需要注意以下三点:1.该细胞生长速度快,容易分化,建议密度达70%时传代;2.不要让细胞长得太满甚至开始融合,影响后续成肌分化率;3.细胞消化完全后再吹打混匀,不要用枪头把没有消化好的细胞吹下来,以免细胞成团。
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问
我借的THP-1细胞长这样了
huarenqiang5
THP-1细胞喜欢酸性环境,在偏酸性环境中THP-1生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是适合细胞生长的,此时补液或半换液即可。有密度依赖性,THP-1细胞密度低时,生长较慢,培养密度维持在50万-100万细胞/毫升为宜;超过200万/毫升则需要传代。
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问
pcr分析:以cDna 和dna为模板,分别pcr,跑出相同位置,可以说明该基因是保守基因吗
juyue2010
看你引物设计位点,光pct产物位置相同不足以说明
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问
大神请教
huarenqiang5
膜对某种离子的通透性越高,该离子的扩散对静息电位的形成就越大,静息电位就越接近该离子的静息电位。所以,膜对钠离子的通透性增加,则静息电位越接近钠离子的平衡电位(E钠),钠离子平衡电位60mv,钾离子平衡电位90mv,所以膜对钾离子通透性增大,静息电位将增大,(更趋向于E钾),膜对钠离子通透性增大,静息电位变小,(更趋向于E钠。)
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问
CT26细胞培养
balalaLy
CT26是很容易从壁上脱下来的,细胞比较满的时候不用胰酶消化也可以吹下来。
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问
【求教】小鼠巩膜RNA提取
juyue2010
使用磁珠提取,损失减少。一张巩膜就可以了
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问
外泌体lncRNA,肿瘤组织中比正常组织中的lncRNA要表达低些,但是外泌体表达要高些
juyue2010
可能是肿瘤细胞将lncRNA通过外泌体排出细胞,完成细胞含量降低
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问
对于stober法合成sio2微球中的乙醇的作用是什么?
zhangzhanghaihai
乙醇可以使生成的二氧化硅微球表面有羟基,提高分散性。
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问
JMP软件非线性回归分析
huarenqiang5
可以参考下这篇文章《如何用JMP软件拟合多元线性回归方程_简易操作版》。
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问
求助,为啥这His标签蛋白纯化杂带这么顽强呢!
huarenqiang5
主要考虑以下几点:1、洗脱条件太温和。2、蛋白在柱子中沉淀。3、非特异性的疏水或者其他作用。4、蛋白和柱子接触时间过长。
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问
求大佬指点
balalaLy
酶切之前的片段是多大?酶切之后有两个片段也正常啊,其中一个目的片段,大的是没有切完全的片段
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问
qPCR的△Rn值由于未加ROX增高
土井挞克树
可以使用,你后边调节一下基线。
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问
磁珠分选小鼠脾脏来源的Treg细胞,培养扩增结果不好,不知道哪里出来问题
juyue2010
分选出的免疫细胞,初始接种密度非常关键,
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问
请问:我要测TC.TG,现需要取血获得血清,取血时需要在离心管中加入肝素或抗凝剂吗
huarenqiang5
血清的提取不能加抗凝剂,应在取血后尽快中低速离心,全血分层后最上一层澄清液体既是血清。另外需要避免冻融发生溶血,这样血清层也会被染红则无法区分。
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