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问
如何确定合适的内参基因用于泛肿瘤某个目标基因的RNA表达水平。
土井挞克树
高度或中度表达,排除低表达基因;稳定表达于各组织和细胞中;表达水平与细胞周期以及细胞是否活化无关;其稳定的表达水平与目标基因相近;不受任何内源性或外源性因素的影响,如不受任何实验处理方法的影响。
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问
CAP认证时,PCR实验按照LDT的标准每个指标都需要验证通过才算实验验证成功吗?
土井挞克树
是的,最起码你的主要检测指标都要通过验证。
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问
用流动相平衡基线时,为啥一直往负值走?
土井挞克树
①柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) ②流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。) ③流通池被污染或有气体 ④检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线) ⑤流动相配比不当或流速变化 ⑥柱平衡慢,特别是流动相发生变化时 ⑦流动相污染、变质或由低品质溶剂配成
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问
请问跑一次western每个样品上样的蛋白量大概在多少mg范围内呀?
土井挞克树
如果是单一条带的样品10微克的上样量就足够了,如果是细胞裂解液这样的样品可以提高一些上样量30~80微克的样子.
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问
elisa多个板上的数据可以一起比较吗
huarenqiang5
在测定不同板中的样品时,每一个板都对应一条标准曲线。技术错误或者不同的孵育情况, 环境条件都会引起酶标板之间产生不同结果。一条标准曲线测定的样品值必需是在相同环境 下产生的,否则就是无效值。
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问
高效液相色谱跑样一直没出峰是为什么,程序还没跑完可以提前停止,或者能直接改变流动相比例吗
此用户已注销
可以,一般有终止运行或中断运行,停止采集等按钮或选项。但是停止后就无法继续进行数据采集,之后的图谱自然不能进入数据中。需要注意的是如果在停止前仍有色谱峰没有走完,而你在停止后立即进样采集下一针,会导致前一针的峰出在后一针的色谱图中。
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问
WB实验上层胶怎样避免有气泡呢?
huarenqiang5
1)玻璃板一定要洗干净,用洗洁净洗,冲干净后再用双蒸水冲一,晾干。配胶的时候沿管壁缓缓加入各个成分,混匀的时候用手轻轻摇匀,如果用枪吹打时要缓慢且不要打到头。2)配胶时混匀要轻,尽量不产生气泡,上胶时要快,枪也不打到底。加完分离胶后用双蒸水封,待其凝固。即使在上胶时液面上有气泡,加水后也会浮上来。分离胶凝好后,倒掉里面的水,用吸水纸吸干,再加浓缩胶,迅速插梳子。3)倒胶的时候,用1ml的枪沿一侧缓
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问
请问这些293t细胞咋长这样,那些大块的是培养基来的吗,我想知道这些细胞是不是都死了😭😭
Dr_劉医生
不是死亡,293t细胞本来就是上皮样细胞,贴壁生长,大块片状的物质就是上皮样的293t细胞,正常现象。
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问
在qRT-PCR实验中,如果要检测同一种指标,不同组织的mRNA可以用同一个引物进行检测吗。
Dr_劉医生
最好不要,因为同一基因在不同组织中所表现出来的性质是不一样的;除非你对比基因组mRNA中上下游引物扩增的那一段是一致的。
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问
如何将秋水仙素粉末配置成不同浓度0.01%-0.1%的秋水仙素溶液?诱导完细胞鉴定法如何操作?
Dr_劉医生
0.1%浓度就是0.1ug/ml,具体配制方法见下图,而且0.2%左右的应用范围最广。
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问
血卟啉,血卟啉单甲醚,原卟啉的特性以及在抗菌方面的应用
丁香书优
血卟啉单田醚在医药领域的几种新用途,包括治疗动脉粥样硬化、痤疮、尖锐湿疣、喉乳头状瘤、寻常疣、趾疣、扁平疣、鲍恩样丘疹病、人获得性免疫缺陷综合症相关的卡波西肉瘤、牙周炎、口龈炎等疾病。
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问
请问免疫组化DAB染色不均是什么原因,一抗已经全部覆盖,已经封闭画圈
大草原的小灰驴
免疫组化染色时是否将片子置于湿盒中,如果染色温度和湿度控制的不好,可能使画圈附近试剂偏少的地方液体挥发,导致显色的程度不同。建议放入湿盒反应,并适当增加试剂的量。
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问
BPGA泛基因组分析为什么第一步上传文件总是error
paj12345
BPGA软件:处理的数据和软件应该在同一个文件夹,而且最好名字以英文命名,不然就就容易报错。
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问
meta分析不良反应如何纳入研究?
connor312
目前数据太少,建议进一步做亚组分析。
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问
噬红作用
lyang556
直接在丁香实验搜“巨噬细胞功能实验”就行了,有完整的操作步骤和注意事项!
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问
请问大家,为啥PCR产物电泳条带阴阳性是相反的?跑出来结果阴性比阳性还亮,我确定没有加错
Dr_劉医生
没见过条带出现阴阳相反的情况,可能原因是你电泳液ph有问题
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问
细菌分类树状图怎么画
宁静LWS0
细菌分类树状图像,把细菌作为主干,从主干出来每一个分支再分出下一级分支,依此类推,依次是界、门、纲、目、科、属、种。
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问
加Loading Buffer后还能测蛋白浓度吗?
土井挞克树
测不了,LB里的试剂会影响检测的,不准确
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问
引物和CDS区相同还是互补,为什么呢?
红处方567
前向引物相同,后向引物反向互补,为了保证正义链和反义链延伸方向都能按照5'到3'。
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问
请问如何提取大量细胞上清外泌体用于动物实验?
genecreate
只有大量培养细胞了,做动物实验需要的外泌体的量很大,而细胞上清中外泌体并不多
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