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问
对转染shRNA的细胞进行消化传代,会影响转染效果吗?
balalaLy
你是做瞬转的吧,最简单的是你用6cm盘做转染,24小时后消化铺两个12孔板,一个做划痕一个做pcr验证转染效率。
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问
有同学用过人髓核永生化细胞做过实验吗?跟原代的人髓核细胞相比有区别吗?
土井挞克树
原代髓核细胞比较稳定,一般不用髓核永生化细胞。
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问
大家用THP-1细胞做实验一般都在第几代内
土井挞克树
我一般是第五六代左右开始做实验。
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问
请推荐一下耳鼻喉生信+免疫组化实验的中、英文期刊?
Dr_劉医生
中文基本没有接收生信的期刊,可以试试英文的《ACTA OTO-LARYNGOLOGICA》、《ACTA OTORHINOLARYNGOLOGICA ITALICA》
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问
我的睾丸间质细胞一分六两天就长满了是不是不正常啊,攻毒后用流式分析都没有趋势
土井挞克树
没有趋势说明细胞检测不到,建议重新培养。
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问
想要检测T淋巴细胞亚群如cd4、cd8、th17、treg的数量和比例,是不是一定得用流式?其他检测手段可以吗?比如elisa?
土井挞克树
Elisa不好,比例得不到,除了流式你可以跑免疫荧光,通过荧光表达来推算比例。
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问
想做流式细胞术检测cd4、cd8的数量和比例,查的第一步都是制备细胞悬液,意思是一定要培养细胞是吗?能不培养细胞,用血清做吗?
土井挞克树
用血清也需要把细胞提取出来,最起码活细胞和死细胞分开。
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问
用24孔板做siRNA转染,提的rna非常少,能不能把两个复孔的细胞放在一起提取
土井挞克树
提取的rna少可以加大上样量,复孔板混合容易造成污染。
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问
未知mirna的定量分析怎么做呢?
土井挞克树
去做免疫荧光,用荧光强度定量。
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问
flowjo分析流式,如何扣除细胞自带的荧光啊
土井挞克树
可以做荧光补偿,把背景的自发荧光降低,减小影响
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问
WB封闭脱脂奶粉加多了,接近10%了,有影响吗
huarenqiang5
有影响,建议调整抗体的稀释比就可以了。
7 回答
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问
怎么样才能去敲除尽量多的 TP53 蛋白
土井挞克树
可以先用特异性核酸酶剪切一下再敲除。
4 回答
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问
求助:胶体金c线亮,t线不亮怎么回事?
天一湖医者
1、你的抗原分子量多大,金标抗原的质量你是怎么检测的,标记上了没有,标记的好不好都知道不知道。2、首先你要知道你划线的能结合多少的抗体量,你划线量是多少,浓度又是多少
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问
pcr 提取质粒,菌p
dxyc42u
看看pcr过程有没有问题,以前做的时候也是这种情况,最后发现是pcr操作过程有点问题
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问
logit分析只可以用stats分析么
dxyc42u
logit模型常用的工具有BIOGEME ,NlogitC,Stata,SPSS
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问
脂肪面积
dxyc42u
magej中数据分割,测出来体积,然后测得材料重量,是不是密度就出来了。如果ImageJ用的费劲,可以试试Avizo,Amira,Mimics,VG等专业的三维图形图像处理软件。
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问
硫酸铵沉淀
dxyc42u
白色的!而且是加着加着,突然就都析出来了
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问
小鼠来源的骨髓巨噬细胞培养 腺病毒shrna转染
dxyc42u
我们实验室都在换液后加,效果也挺好
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问
转化酒酿酵母感受态
dxyc42u
判断下是否转化成功?一般转化成功:平板出现乳白色单菌落,直径可达1 mm以上,判断为转化成功;如果平板出现一层菌落,或者菌落都太小,不能挑取单菌落,判断为转化失败。常见的失败多为筛选平板上没能长出任何菌落。
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问
有什么方便快捷测反相色谱柱柱效的方法,测柱效进样之前也要冲柱子平基线吗
dxyc42u
测柱效进样之前我们一般是要冲柱子平基线
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