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为什么老是有醇类污染,是异丙醇没洗掉好,还是酒精没挥发好?
dxy_6nz67v87
烘干的时候可以在64度烘箱烘干
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问
大神们,直接提DNA跑PCR和qPCR 与 提RNA反转出cDNA再跑PCR有什么区别啊
周末也要努力呀
D NA之后的步骤没啥区别,跑的程序都是一样的
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问
关于多聚甲醛固定问题
周末也要努力呀
可以的,保存在-80可以好几个月至上年,不反复冻存
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问
190kDa的蛋白怎么跑WB?
张一木
建议可以转膜的时候,选择尝试湿转
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问
Q-PCR和PCR引物设计的区别在哪?
啥也不懂来问we问
qpcr引物特异性要求更高,且qpcr扩增长度更短。
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问
GAPDH的三次重复CT值围绕10和13波动,而目的基因CT值三次重复比较稳定
周末也要努力呀
PCR过于灵敏,结果受外界干扰较大。建议三个重复在同一个版上进行
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问
LPS刺激THP-1
周末也要努力呀
不需要加,重新加入培养基就行。
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问
只检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 mRNA, 不检查相应的蛋白表达可以吗
周末也要努力呀
一般情况下蛋白和基因都检测及更有说服力
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问
求助 APY29作为IRE1的抑制剂可以用于小鼠身上吗?
周末也要努力呀
可以。腹腔注射是最常用的方法。
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问
求助:这是支原体污染吗
dxy_zjrr9bd2
用高倍镜看,看有没有会动的小点
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问
24孔板种爬片免疫荧光,推荐的细胞密度是多少,多少个细胞一个孔哇?
dxy_zjrr9bd2
看细胞生长快慢,5-10w可以做一个密度梯度,方便找单个细胞观察
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问
请问大佬,你们学qpcr一开始学到会运用学了多久
静夜听江
有人带的话,一天就够了。包括学习qpcr原理,试剂种类,引物设计,实验protocol,仪器操作,以及数据处理。
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问
为什么我跑出来的条带背景都黢黑黢黑的啊?有没有啥解决办法呀?
皮皮闲husky
可以试一下将二抗孵育时间缩短一点,封闭时间长一点,洗干净
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问
枯草芽孢杆菌怎么转大质粒,一直转不进去?
沫子大大
要提高枯草芽孢杆菌大质粒的转化效率,需要注意DNA质量、外源DNA的量和比例、处理细胞的方法、转化条件、抗生素的选择和使用等多个因素。
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问
小鼠玉米赤霉烯酮灌胃用什么溶剂?
dxy_d96xdqj6
我们用的生理盐水,一只大概控制在0.15ml左右(35g)
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问
关于质粒在细胞中的表达问题
汤姆卜丽波
一般穿梭质粒都是入核的,要不然在细胞质没办法表达,入核之后就是正常的转录翻译了,会有剪接过程
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问
C2C12在爬片上诱导分化
dxy_62ht8pf0
我也是,请问有找到解决的办法吗
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问
NLRP3 BV2
paj12345
LPS浓度1mg/L作用24h,参考文献:《甘草酸二铵通过 TLR4/NF-κB 信号通路负调控 LPS 诱导的 BV2 小胶质细胞的神经炎症反应》,如果要加药,药物预处理2h后再用LPS造模。
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问
关于C2C12的一些疑问
你好几和户
C2C12成肌细胞是在成人骨骼肌组织中发现的在创伤后重建肌肉组织的前体细胞,具有很好的分化能力,C2C12成肌细胞经常被用来作为在体外系统研究肌肉的发育和分化,可以分化多核肌管,并表达成熟骨骼肌的各种标志蛋白的。
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问
谷氨酸棒状杆菌电转
婷婷油条
从镜检结果看,大概率是污染了枯草。
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