实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问PCR实验的样品如何准备?

李亚彪111

引物，dNTP，以及合适的PH值等，加样量以及变性退火延伸的温度都要考虑，个人愚见

1 回答356 围观

问请问pcr后加入Dpn1 的作用是什么啊

Junego

Dpn1能够去除甲基化质粒，如果模板是质粒，加入该酶后可以消化质粒，消除残留质粒对下游克隆转化的影响。

1 回答2249 围观

问请问各位老师，这个是污染吗？这些东西贴壁，但是没有动，培养基没有变色并且不混浊。请问老师们有没有什么建议呢？

嘉沅十分

细胞养了多久了呀？咋看起来那么像是增殖过快铺板铺满了呀

1 回答239 围观

问大家平时用什么软件查看文献？

dxy_7vr68nd2

知网研学，pubmed ,zero

1 回答282 围观

问线粒体DNA检测-PCR技术

Felidae2XKT

我觉得是核DNA，nucleus DNA，反应组织或细胞样本量的多少，mtDNA/nDNA表示mtDNA相比于核DNA的均一化

1 回答749 围观

问求大佬解答为什么我的空白pcr出来的条带跟我的样本是一样的呀，水换过跑出来也是一样的

dxy_v8mk5fi6

1、可能空间污染，可以开窗通风+实验室消毒。2、如果水换过没问题的话，可能试剂污染了，这种情况就比较复杂了，也不确定哪个试剂污染了，只能在实验室消毒后，一个一个试剂测试一下了。想起以前做QPCR实验的时候遇到这个问题，头都大，所有试剂换了个遍，也没找到原因。最后实验室通风+消毒+换试剂，然后还是不行，然后后面也不知道咋搞的，突然就没事了。咱也说不清。

1 回答369 围观

问如何获得KxBN血清造类风湿性关节炎模型？

土井挞克树

首先Kx BN血清可以通过正规厂家购买，其次可以培育KxBN小鼠获得此类血清

4 回答1467 围观

问检测细胞上清液中NO含量

心语zym

您好！我想请问您是使用Griess法测的上清NO含量吗

4 回答1948 围观

问RPA扩增产物不能与Cas12a反应

土井挞克树

因为RPA的扩增产物会激活Cas12a酶的切割活性，然后被顺式切割导致模板失效，所以不与Cas12a反应。

4 回答594 围观

问求助，人外周血单核细胞诱导成巨噬细胞

dxy_ft9j5jz

你好请问解决了吗？我也感觉我提出来当天贴壁效果很好，加药M-CSF 25 ng/mL 24小时以后反而飘了一些

4 回答630 围观

问泛素化条带没有出现拖带现象，而是出现了几个明显的单独的条带，请问一下是什么原因呢？

dxy_e30rps3r

请问有解决吗？我也出现相同情况，input组ub发光也是正常的，ip组就是有单独条带

5 回答8183 围观

问真皮成纤维细胞鉴定

岭上逆黄风

你好请问你有提取成纤维细胞的实验方案嘛可以求一个嘛我自己查的都不太行

3 回答427 围观

问我是个新手，做了两次EAE模型都不成功，有没有模型成功的前辈啊，能否指导指导我😂

暂时想不出好名字

你后来成功了没有啊😂能不能请教下你🥹

2 回答500 围观

问RA-FLS类风湿关节炎成纤维滑膜细胞

dxy_u88vw0a5

你好，你的问题解决了吗？我这边试剂公司给的建议是买专门的培养基，我看价格有点小贵，用我们自己的培养基和血清的话应该怎么处理细胞会长的快一点？

3 回答729 围观

问RNA提取

drzzzxxxx

od值只是反应纯度，和rna质量有什么关系？上面几个人真的是误人子弟，你要验证有没有降解就跑个胶，看28s，18s，5s，引物没问题的情况下，内参ct只大很有可能就是降解了。

5 回答479 围观

问如何寻找某基因的启动子序列以及起始密码子ATG ？

一个人L0FF

请问你的问题解决了吗，我目前也在找确定某个基因的起始密码子ATG和启动子序列，需要向你学习一下，非常感谢！

3 回答1665 围观

问冰冻切片贴片、冰晶等问题

麻黄连翘赤小豆

包埋剂挤下去的时候减少气泡，还有组织在之前用蔗糖脱水要足够时间可以减少水分减少冰晶

4 回答991 围观

问Fish实验探针设计问题？

kkkinorrr

请问您现在知道怎么设计探针了吗？

4 回答723 围观

问提磷酸化蛋白可以使用超声细胞破碎仪吗？有什么别的方法替代呢？

在路上仰望星空

同学，请问你超生处理了吗？效果如何？

4 回答989 围观

问请问如何得到纯化的目的蛋白？

detaibio

一般来说，蛋白质表达纯化中常见的蛋白挂柱洗不下来的情况有以下几点：1.蛋白本身疏水性强，容易沉淀。2.溶液中离子强度有点高（降低溶液中的离子强度）3.溶液的PH值低（提高溶液的PH值）把蛋白弄下来的办法有，关健是看你后继想用蛋白做什么。

1 回答2225 围观

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