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        Caco2细胞单层膜

        相关实验:细胞膜完整性及膜转运功能检测实验

        user-title

        彭咕噜耶

        做转运前两天测了一次荧光素钠渗透 显示低渗透


        做完转运后用培养基孵育了一段时间用该孔又做了一次荧光素钠渗透 结果不在标准范围内

        是我的给药导致膜破损了吗 或者给药2h时间太长导致膜破损

        还是过了两天单层膜不行了


        (也有可能这21天单层膜本来就不太好)

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        3 个回答

        user-title

        dxy_p7vh6ol3

        有帮助

        你用的荧光素钠浓度是多少,我用400ug/ml细胞飘了

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        根据你的描述,出现转运实验前后荧光素钠渗透性结果的差异可能有多种原因:

        1. 给药导致膜破损:给药过程中可能发生了膜的破损,导致荧光素钠可以更容易地渗透进入细胞。这可能是由于给药剂量过高或给药时间过长导致细胞膜的破坏。

        2. 给药时间过长:给药时间过长可能导致细胞内的代谢过程发生变化,进而影响细胞膜的完整性。如果给药时间过长,细胞膜可能会受到损伤或变得不稳定,从而导致荧光素钠渗透性的增加。

        3. 单层膜的老化:Caco-2细胞是一种肠上皮细胞模型,单层膜在培养过程中可能会经历老化和功能下降。如果细胞已经培养了21天,并且单层膜质量不佳,那么这可能导致荧光素钠渗透性的异常结果。

        要进一步确定问题的原因,可以考虑以下操作:

        1. 重新评估给药方案:检查给药剂量和给药时间是否合适。尝试不同的给药方案,如减少给药时间或给药剂量,以观察对细胞膜完整性的影响。

        2. 评估细胞膜状态:使用其他方法评估单层膜的完整性和功能状态,如透过性测定、细胞形态观察或电子显微镜等。这有助于确定是否存在细胞膜老化或破损的问题。

        3. 进行相关实验控制:使用适当的阴性和阳性对照来验证实验结果。确保阴性对照组显示较低的荧光素钠渗透性,而阳性对照组显示较高的荧光素钠渗透性。

        4. 考虑其他影响因素:除了给药和细胞膜状态外,还要考虑其他可能影响结果的因素,如培养基成分、细胞密度、孵育条件等。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        都有关系,先调整一下给药时间吧,把给药时间缩短一下看膜的状态

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