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求助 ‖ 壳聚糖纳米颗粒怎么测电镜,要用导电胶吗?
土井挞克树
需要导电胶的,不然电镜下不显影。
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问
请问多重PCR的体系如何优化?
huarenqiang5
在选择多重PCR扩增条件(尤其是退火温度和时间)时应尽量选择有利于较大片段扩增的条件 (1)退火时间和温度在循环参数中,影响多重PCR扩增效率的主要因素是复性温度和延伸时间。复性温度的设置策略与单个PCR相似。先计算引物的熔解温度(Tm),在此基础上推算复性温度T。(T=T。-5)。然后用“逐步引人法”确定多重PCR的最佳T,即每增加一对引物,就根据扩增的结果调整复性温度,直至每一种被扩增的基因片
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问
组织固定脱水oct包埋放-80冰箱还能解冻做阿利新兰骨染色么?
土井挞克树
可以的,短时间内负80度是没有问题的。
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问
求助/巨噬细胞状态
土井挞克树
考虑是有污染存在,建议消毒杀菌
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问
想要验证是否已经是敲除了dicer2的sf9细胞,仅用PCR的方法而不用质谱分析或测序的方法靠谱吗?
loveliufudan
使用PCR的方法来检测dicer2基因是否已被敲除可以是一种可靠的方法。PCR是一种快速、简便、敏感和特异性较高的技术,可用于检测基因是否存在,是否发生了突变,以及插入或删除的DNA序列等。通常可以通过设计一对引物,针对dicer2基因的靶位点进行PCR扩增,并在扩增产物中检测dicer2基因的存在情况。如果在PCR扩增产物中检测不到dicer2基因的特异性条带,则可以初步判断该细胞中dicer2
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问
可以用紫外线照射sf9昆虫细胞以减少支原体污染吗?
loveliufudan
ST9昆虫细胞的培养过程中可能会出现细菌、真菌或其他微生物污染,其中支原体是一种常见的细菌污染。紫外线照射可以用于减少支原体污染,但它并不总是有效的。支原体是一种比较顽固的微生物,对紫外线辐射的抵抗力比较强,因此需要采用一定的条件和方法才能有效地减少其污染。下面是一些使用紫外线减少支原体污染的常用方法:使用紫外线杀菌器。这种设备可以将细胞培养器放入其中,在紫外线照射下杀死支原体和其他微生物。但是需
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问
请问一下,复苏的细胞量太多了,第二天就需要传代,会影响细胞状态吗?
loveliufudan
复苏的细胞数量过多,如果不及时传代,会导致细胞密度过高、营养物质不足、代谢产物积累等,从而影响细胞状态和生长状况。因此,第二天需要传代的情况下,最好不要等到细胞密度过高才进行传代,应尽早进行。细胞密度过高会导致细胞之间竞争养分和空间资源,细胞生长受到限制,细胞进入停滞期或凋亡状态。另外,过高的细胞密度还会增加细胞间的接触和摩擦,增加细胞的损伤和死亡风险。细胞密度过高还会导致代谢产物的积累,如乳酸和
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问
做中药含药血清,如何通过预实验来确定合适的给药剂量呢?
土井挞克树
可以在剂量梯度实验,通过梯度给药得出合适剂量
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问
细胞培养的相关问题?
土井挞克树
培养基变黄就是细胞代谢的产物太多了,所以影响细胞培养。
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问
细胞传代1次之后就开始死亡是为什么?
土井挞克树
可能是营养不够了,建议加血清试一下。
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问
细胞培养液变黄原因及会影响细胞状态吗?
土井挞克树
少量清澈发黄是不影响的,可以继续培养。
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问
血小板活化是可逆的吗,可以使用台式液使其恢复静息状态?
土井挞克树
理论上是不可逆的,活化后不能恢复静息状态。
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问
研究HBV的复制应该用哪种肝细胞合适
sswei
体外研究一般用克隆的病毒基因组转染肝肿瘤来源的细胞系后可实现HBV复制和病毒颗粒组装,或采用人原代肝细胞(PHH)来源的。
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问
细胞培养过程中,PH突然变化快的原因有哪些?
sswei
培养过程中,生长期细胞代谢旺盛,产生CO2与乳酸,导致pH的下降,而后随着稳定期、衰亡期的到来,CO2释放多于生成,乳酸有可能有所消耗,培养液pH值逐渐上升。
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问
单个B细胞制备单克隆抗体
loveliufudan
进行流式细胞分选时,选择特定的荧光标记可以区分不同类型的免疫球蛋白(Ig),例如IgM和IgG。在某些实验中,需要对不同类型的B细胞进行分离和分析,以了解它们在免疫应答中的不同作用。对于只需要分离IgG的B细胞的实验,原因可能是因为IgG是较为常见的免疫球蛋白类型,也是典型的记忆性免疫应答的产物。在初次感染后,B细胞会分泌IgM抗体,然后在IgM介导的清除病原体过程中,一些B细胞会转化为IgG产生
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问
分子标记实验Pcr结果太糊
sswei
主要存在引物质量差,PCR反应扩增增强等所致。据此,需要更换引物,优化pCR反应流程。
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问
噬菌体展示能在普通生物实验室进行吗?
sswei
需要在无菌的条件下进行实验操作,否则容易失败。
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问
crispr慢病毒文库感染293T细胞时,细胞接种密度多大?
sswei
crⅰspr慢病毒文库感染293T细胞时,细胞接种密度大概50%~70%为好。
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问
新手请教一个问题,为什么这里会出现负值?
sswei
可能存在数据转换、计算过程中的错误,应该重新开始。
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问
蛋白表达是包涵体怎么办
dxy_kdzvaizq
1. 降低诱导温度2. 降低诱导剂浓度
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